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细菌奈瑟染色法

2019.4.08

细菌奈瑟染色法可以用于芽孢染色(1)细胞的观测(2)细胞形态的检测与分类。

实验方法原理芽胞具有高度的折光性,外膜致密,渗透性低,故普通染色法不易使其着色,芽胞染色法是根据芽胞既难以着色,而一旦着色又难以脱色的特点设计的,所有芽胞染色法都基于同一个原则:采用着色力强的染料,并加热以促进标本着色,然后使菌体脱色,而芽胞上的染料仍保留,经复染后,菌体和芽胞呈现不同的颜色。
实验材料

细菌样品

试剂、试剂盒

美兰95%酒精冰醋酸结晶紫黄叱精奈瑟染液

仪器、耗材

显微镜

实验步骤

1、材料


(1)染液甲


第一液:美兰1g,95%酒精30ml,冰醋酸50ml,蒸馏水100ml。


第二液:结晶紫1g, 95%酒精10ml, 蒸馏水300ml。


以上第一液二份,与第二液一份混合之。


(2)染液乙,黄叱精1或2g,热蒸馏水300ml,待溶解后过滤。


2、染色法


(1)涂片按常规法固定后,滴加奈瑟染液甲液数滴于涂片上,15~30 Sec,水洗。


(2)用奈瑟染液乙液复染10~30秒钟。


(3)迅速用水洗,吸干、镜检。


3、结果


菌体呈鲜明黄色、异染颗粒呈深紫兰色。

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注意事项

1. 涂片按照常规方法要固定好,防止脱落。


2. 使用显微镜时需要调节好物镜与目镜。

其他

制成涂片后,用两份溶液I和一份溶液I的混合液,染70秒钟,水洗.再染以溶液,再水洗,吸乾后镜检,菌休菊橙色,异染粒深蓝色。


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