人胰腺腺癌细胞BxPC3细胞培养步骤
悬浮细胞:
计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期，以大约200～400g离心5分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到zui小体积，不要搅乱细胞。
MCF7细胞 （1×T25培养瓶#密度75%提供技术服务）复苏细胞
以1×107到5×107细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以0.5×107到1×107在无血清培养基中，再次悬浮细胞，分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。
BT-20细胞 （1×T25培养瓶#密度75%提供技术服务）复苏细胞
细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
冻存配方：向培养液加入保护剂二甲基亚砜(DMSO)或甘油,封入安瓶中。存于在液氮中温度可达到－196℃，可长期储存。如解冻后细胞复苏，仍能继续增殖生长，细胞性状不受影响，成为保存细胞zui主要的手段。
KLE细胞 （T25培养瓶@密度75%）中文说明书一份（传代方法，培养条件等）STR鉴定
冻存管细胞复苏之离心去除冻存液：
1)：把解冻完全溶解后的细胞快速放入离心机，2000r/min 或500g离心2min；吸弃上清液；
2）：用8ml完全培养基（通派细胞库可供应细胞相应配套完全培养基=培养基+正品gibco胎牛胎牛血清+生长因子）重悬细胞，吹打制备细胞悬液，细胞浓度以5×105/ml为宜。
3）：将制备好的符合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内，将培养瓶放入37℃和5％CO2的培养箱内，8-24小时后换液继续培养，换液的时间由细胞生长情况而定。
推荐
