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反复贴壁法纯化的方法介绍

2022.11.21

成纤维细胞与上皮细胞相比,其贴壁过程快,大部分细胞能在短时间内(大约10~30min)完成附着过程(但不一定完全伸展),而上皮细胞(大部分)在短时间内不能附着或附着不稳定,稍加振荡即浮起,利用此差别可以纯化细胞。其方法如下:

(1)将细胞悬液接种在一个培养瓶内(最好培养液内不含血清,此时上皮细胞贴壁更慢)静置20分钟。

(2)在倒置显微镜下观察,见部分细胞贴壁,稍加摇动也不浮起时,将细胞悬液倒入另一培养瓶中,继续静置培养20min,然后再重复上述操作后,即可将上皮细胞和成纤维细胞分隔开,在第1瓶和第2瓶以成纤维细胞为主,往后几瓶即以上皮细胞为主,下次传代时再按上述方法处理,就可使两者达到完全分开的目的。


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