梯度方法开发首先要明确目标，如整个色谱峰组保留时间太长，分离度也不好，杂质分离等；然后对症下药，如为使色谱峰前移，提高起始乙腈的比例，分离得到改善。

　　最后，李老师又介绍了其它几种梯度形式并用赵老师的话总结了选择梯度的原因：不管是作单一的还是多个化合物的分析，液质联用尽量用梯度洗脱，以来可以使质谱峰形更窄，灵敏度更高；更重要的是可以降低成本，比如对一根新色谱柱，走等度可走1000针，而梯度可以到2000针；梯度方法里，柱子被清洗得更干净。