液体培养基—石蕊牛乳培养基
[用途]
观察细菌对牛乳的凝固及发酵作用。
[配法]
新鲜脱脂牛乳1L,20g/L石蕊水溶液10ml(16g/L溴甲酚紫乙醇溶液 1ml)(pH6.8)。
将新鲜牛乳隔水煮沸30min,冷却后置4℃冰箱内过夜。用吸管吸出下层乳汁,注入另一烧瓶内,弃去上层乳脂。加入石蕊溶液,分装试管,灭菌113℃15min(或间歇灭菌)。置35℃ 培养24~48h,若无细菌生长,即可4℃冷藏备用。
[用法]
将被检菌接种于上述培养基中, 若为芽胞梭菌,要在培养基内加入微量铁末,于35℃培养8~24h,必要时可延长至14天。
[观察结果]
产酸 因发酵乳糖而产酸,使指示剂变为粉红色。
产气 发酵乳糖同时产气,可冲开上面的凡士林。
凝固 因产酸太多而使牛乳中的酪蛋白凝固。
胨化 将凝固的酪蛋白继续水解为胨,培养基上层液体变清,底部可留有未被完全胨化的酪蛋白。
产碱 乳糖不发酵,因分解含氮物质,生成胺及氨,培养基变碱,指示剂变为蓝色。
不变 乳糖不发酵,指示剂无变化,与未接种管相同。
白色 石蕊被还原成白色。
急骤发酵;酸凝块被产生的大量气体所破坏。
[质量控制]
粪产碱杆菌,碱性反应,培养基呈蓝色;变形杆菌,没有变化,培养基仍呈紫色;产气荚膜梭菌,急骤发酵,酸凝块被气体破坏。
注:培养基在灭菌前加入凡士林,可观察厌氧菌对牛乳中乳糖分解情况。若全脂牛奶需行脱脂处理,该培养基pH 6.8,呈紫色。
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