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酶联免疫吸附剂测定——ELISA检测

2019.7.18

近年来在食品检验、疾病诊断和预防的过程中ELISA检测也日益凸现其重要作用。

酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)即采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。

经典的化学分析方法(滴定分析、重量分析、简单的吸光光度法)是以简单离子或分子为检测对象的常量或微量分析,面对生物体系成分复杂且待测物浓度较低的测试条件则往往无能为力。它将免疫学知识与化学分析手段有机结合,为生命体系中高特异性、超微量的分析提供了解决方法。

基本原理:

ELISA检测采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。


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