细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始（二）
终端滤器可用于去除纯水中特定类型的污染物，满足不同实验的应用需求。对于细胞体外培养可以选用RephiBio Filter 纯水终端过滤器，安装在乐枫超纯水系统的出水口，可有效去除水中的热原（内毒素）、核酸酶、细菌等杂质，制备符合细胞培养用水要求的超纯水（无热原、无DNase、无RNase、无菌）。
对于超纯水而言需要格外注意终端水质的TOC、电阻率、细菌和内毒素的含量，必须做到即取即用，因此取水的远程监控和水质实时监测就显得尤为重要。目前已有厂家可以提供与手柄通过无线连接的实验室纯水机（如上面提到的Genie），将水机和取水手柄分别放在洁净间的内外，通过无线控制取水手柄达到超纯水的取用和实时检测水的电阻率和TOC数值，非常适合无菌环境下的操作，最大限度减少污染。
| 无线 · 自由 |  |
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| 手柄触屏信息
系统运行状态：待机，泄压，循环，产水 水箱液位：0%或者L 纯水（超纯水）水质参数：电阻率、TOC、温度 |
终 端 水 质
实 时 监 测 |
结合上述用水要求，为大家推荐两款制备超纯水的水机，Genie G一体化纯水仪和Genie PURIST 超纯水仪。
Genie G一体化纯水仪 以自来水为进水制备超纯水和 EDI 二级纯水 | 性能指标
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Genie PURIST 超纯水仪 以纯水（EDI 纯水，RO 水或蒸馏水等）为进水，制备实验室超纯水。 | 性能指标
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【注意事项】
1.超纯水应当注意使用时间，最好应该“即取即用”。防止超纯水吸收外界的杂质导致水质下降。
2.在合适的环境使用超纯水。环境中的VOC（挥发性有机物），细菌等都会影响细胞培养。
3.培养细胞的容器应当洁净无污染。
4.配制离散细胞用的消化液和细胞洗涤液时，宜采用钙、镁离子含量低的缓冲液，缓冲液用水可以选用装配乐枫低镁型纯化柱的纯水机，避免钙、镁离子促使细胞凝聚作用的产生。
不同细胞体外培养用水选择指南
细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养的整个流程中实验用水贯穿每一个环节：
1.取材：组织的清洗和灌注试剂用水，如PBS缓冲液、Hanks液的配制；
2.原代培养：1640、DMEM等培养基用水，明胶等支持物的配制，添加药物、检测试剂的配制；
3.传代培养：胰酶等消化液的配制；
4.冻存：细胞冻存液DMSO的配制。
细胞体外培养的细胞类型一般分为动物细胞培养、植物细胞培养和微生物培养，其中最难的是动物细胞的培养。动物细胞的培养除了需要无菌、温度、气体、渗透压、pH等基本条件，它还需要血清、支持物等特殊物质，其中原代细胞的培养是最难的。植物细胞的培养需要光照和激素，而且培养条件和培养技术比较成熟。微生物培养多为单细胞生物，微生物人工培养的条件比动植物细胞简单得多，蛋白胨、麦芽汁、酵母膏等天然培养基即可满足微生物的营养要求，其中厌氧微生物培养比好氧微生物复杂，需要维持CO2等非氧惰性气体的浓度。
由于细胞的种类和培养条件不同，对培养环境中杂质的含量要求也不同，那么配制培养基或试剂用水的选择大有讲究，不同细胞体外培养用水的指标如下：
细胞体外培养用水选择
细胞类型 | 纯水等级 | 电阻率 (MΩ·cm) | TOC (ppb) | 微生物 (cfu/mL) | 内毒素(Eu/mL） | 核酸酶 (pg/mL) |
动物细胞 | 超纯水 | >18 | <10 | <1 | <0.002 | ND |
植物细胞 | 超纯水 | >18 | <10 | <1 | <0.002 | ND |
微生物 | 实验室Ⅱ级纯水 | >10 | <50 | <1 | NA | NA |
从上表可以看出，动物细胞和植物细胞的培养对去除内毒素和核酸酶的要求很高，用于这两类细胞培养可以选择商品化的细胞培养用水，另外去除纯水中的内毒素和核酸酶可以通过在纯水机的取水口安装终端滤器达到。
各种细胞培养用水的比较
细胞培养用水 | 制备方法 | 优点 | 缺点 |
商品化细胞培养用水 | 纯水或超纯水进行多效蒸馏制成，严格控制热源、无菌、内毒素、pH、渗透压等指标 | 水质标准程度化高，可保证实验结果的重复性 | 价格昂贵 |
DEPC水 | DEPC处理过并经高温高压灭菌的MiliQ纯水，无RNase、DNAase和proteinase。 | 完全去除核酸酶 | 价格昂贵，未去除内毒素 |
终端滤器过滤超纯水 | 采用0.22µm的过滤膜，可有效去除水中的热原（内毒素）、核酸酶、细菌等杂质。 | 性价比高，供水量大 | 对取水环境要求高 |
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