UV法测定饮用纯净水中的DEHP含量
本实验利用正己烷萃取饮用纯净水中的邻苯二甲酸二己酯，氮吹并用甲醇定容，建立了紫外分光光度法对其进行含量测定， 并对条件进行优化。方法标准曲线方程为y=1.5347x+0.0266，线性相关系数为0.997，该方法连续测定精密度为0.644%，重现性RSD为0.5742%，加标回收率为88.89~97.73%。结果证明，应用紫外分光光度法测定瓶装饮用纯净水中邻苯二甲酸二己酯，方法简单快速，结果令人满意。
邻苯二甲酸二己酯(DEHP)是邻苯二甲酸酯的一种，是一类普遍使用的化学物质，常用作增塑剂及其他日常用品的生产原料。邻苯二甲酸酯类化合物在塑料中为游离状态，极易转移进入环境，广泛分布于水体，大气中，成为全球最普遍的污染物之一。研究表明，邻苯二甲酸酯类化合物的急性毒性作用并不明显，但可引起肝、肾、肺以及生殖等系统的中毒，其中以雄性生殖系统的损害最为明显。为此许多国家开始限制在塑料食品包装材料中使用某些邻苯二甲酸类物质。目前我国还未对不含油脂样品中各邻苯二甲酸酯化合物的含量进行规定。目前邻苯二甲酸二己酯的主要测定方法有气相色谱质谱法，气相色谱法，高效液相色谱法等。其检测方法的仪器较为昂贵。由于邻苯二甲酸二己酯在紫外区域224nm处具有最大紫外吸收，且线性关系良好，可采用紫外分光光度法进行测量。
材料与方法
材料与试剂
甲醇、正己烷等，所用试剂均为分析纯，实验用水为超纯水。邻苯二甲酸二己酯购买于
上海安谱科学仪器有限公司。市场上某品牌饮瓶装饮用纯净水。
仪器与设备
UV2550 紫外可见分光光度计(日本岛津公司)、电子天平。
溶液配制
邻苯二甲酸酯标准溶液的配制：精密吸取20µl的邻苯二甲酸二己酯至100ml容量瓶中，甲醇定容，得浓度为200µg/ml 的DEHP 溶液。依次稀释至10ml容量瓶中，浓度分别为20µg/ml、2µg/ml、0.2µg/ml。精密吸取2.5ml，0.2µg/ml 的溶液至10ml容量瓶中,甲醇定容,浓度为0.05µg/ml。
测定的狭缝宽度选择
吸取0.05µg/ml 邻苯二甲酸二己酯溶液于比色皿中，以甲醇溶剂作为空白进行基线的确定。设置仪器的狭缝宽度分别为0.1、0.2、0.5、1、2、5，进行多次重复测定，考察检测信18号的灵敏度及精密度并选择最佳狭缝宽度。
最大吸收波长的选择
吸取0.05µg/ml 的DEHP 溶液于比色皿中，以甲醇溶剂作为空白进行基线的确定，在190~400nm 的波长范围内以确定的最佳狭缝宽度多次进行光谱的连续扫描，确定DEHP的最大吸收波长。
标准曲线的绘制
从0.2µg/ml 标准溶液中精确吸取1ml、2.5ml、5ml 定容于10ml 容量瓶，配置0.02、0.05、0.1µg/ml 浓度的标准溶液。从2µg/ml标准溶液中吸取5ml 定容于10ml 容量瓶中配置1µg/ml 溶液。从20µg/ml 浓度标准溶液中吸取0.75、1ml 定容至10ml 容量瓶中配置1.5、2µg/ml 溶液。标准溶液均用甲醇定容。采用最佳狭缝宽度，并在最大吸收波长处进行紫外扫描得出DEHP 标准曲线并计算出线性相关系数。
仪器精密度的测定
吸取0.05µg/ml 邻苯二甲酸二己酯溶液于比色皿中，以甲醇溶剂作为空白进行基线的确定。采用确定的最佳狭缝宽度对标准液进行连续20 次重复光谱扫描，在最大吸收波长处测定其吸光度值，计算其精密度。
样品重现性的测定
分别取两份液体样品20ml，其中一份加入0.05µg/ml 邻苯二甲酸二己酯溶液10ml，同时加入正己烷10ml，充分震荡，静置分层，去上层清液，氮吹至干，最终甲醇定容于10ml容量瓶，以甲醇溶剂作为空白进行基线的确定，采用确定的最佳狭缝宽度，在最大波长处进行紫外扫描。此方法连续进行10 天重复光谱扫描，计算其精密度。
样品加标回收率的测定
量取混合均匀液体样品20ml，加入正己烷10ml，充分震荡，静置分层，去上层清液，氮吹至干，最终甲醇定容于10ml 容量瓶。装入比色皿中在最大波长处进行紫外扫描，确定空白样品中DEHP 的含量。分别量取三份均匀液体样品20ml，加入1ml、2.5ml浓度为0.2µg/ml 的DEHP 溶液和0.5ml 的浓度为2µg/ml 的溶液，分别加入正己烷10ml，充分震荡，静置分层，去上层清液体，氮吹至干，最终甲醇定容于10ml 容量瓶。以甲醇溶剂作为空白进行基线的确定，采用确定的最佳狭缝宽度，在最大波长处进行紫外扫描。每组回收率测定三次，取平均值进行计算。
检出限的测定
以甲醇溶液确定基线，采用确定的最佳狭缝宽度对甲醇溶液重复20次扫描，计算在最大吸收波长处吸光度值，利用公式DL=3Sb/S计算仪器检出限。量取浓度为0.05µg/ml 的DEHP 溶液10ml，加入正己烷10ml，充分震荡，静置分层，去上层清液，氮吹至干，最终甲醇定容于10ml 容量瓶。装入比色皿中在最大波长处连续进行20次紫外扫描。利用公式DL= 4.6σ 计算样品检出限。
样品的预处理与测定
量取混合均匀液体样品20ml，加入正己烷10ml，充分震荡，静置分层，去上层清液，氮吹至干，最终甲醇定容于10ml 容量瓶。装入比色皿中在最大波长处进行紫外扫描。
干扰物对试验的影响
分别配制安赛蜜、糖精钠、苯甲酸0.5µg/ml，2µg/ml，2.5µg/ml 三种浓度溶液，取1ml分别与1ml，0.5µg/ml 的DEHP 溶液混合，加入正己烷10ml，充分震荡，静置分层，去上层清液，氮吹至干，最终甲醇定容于10ml 容量瓶。装入比色皿中在最大波长处进行紫外扫描，测定其吸光度值变化，并考察样品经过前处理后吸光度值的变化。
结果与分析
DEHP的狭缝宽度选择
由图1 可知，随着狭缝宽度的增大，吸光度信号值的灵敏度不断降低，但表1 可知测定结果中较小狭缝宽度精密度较之大狭缝宽度差，综合考虑精密度与信号强度之间的关系，选择0.5 作为最佳狭缝宽度。
图1. 狭缝宽度对吸光度的影响。
表1. 不同狭缝宽度的精密度测定
DEHP最大吸收波长的选择
由图2可知，邻苯二甲酸二己酯在200~400nm 范围内，在224nm 具有最大吸收波长，且较为稳定，适合作为最大吸收波长进行试验。
图2. 最大吸收波长的确定。
DEHP标准曲线的绘制
由图3 可知，浓度在0.02~2µg/ml 范围内溶液的吸光度值随着浓度的增加呈线性变化，线性方程为y=1.5347x+0.0266，线性相关系数为0.997，线性关系良好。
图3. DEHP 标准曲线。
仪器精密度的测定结果
试验结果如表2可知，连续20次重复测定样品的平均值为0.1056，样品RSD为0.644%，精密度较好。
表2. DEHP 精密度测定的结果
DEHP的重现性结果
由表3可知，连续10天测定样品浓度的平均值为0.9901µg/ml，样品RSD为0.5742%，重现性较好。
表3. DEHP 样品重现性结果
加标回收率及检出限
试验结果如表4，加标回收率范围从88.89~97.73%，加标回收RSD 范围从0.33~2.34%，回收率在正常范围内。仪器检出限为0.016µg/ml，样品检出限为0.02µg/ml 与国家标准GB/T
21911-2008 中GC-MS 方法的检出限0.05µg/ml 相比检测限更低。
表4. DEHP 加标回收率测定结果
样品测定结果
依照试验方法测定的瓶装饮用纯净水中DEHP 的含量的平均值为0.0503µg/ml，按照国标气质联用测定方法测定的样品中DEHP 的含量的平均值为0.0541µg/ml。两种方法采用相
同前处理步骤，外标法进行定量分析，其结果基本一致。
干扰物对试验的影响
由于安赛蜜、糖精钠、苯甲酸在224nm 处同样具有紫外吸收，其存在会影响DEHP 测定的吸光度值。实验结果如表5 表明，安赛蜜、糖精钠、苯甲酸的分别加入对DEHP 含量的测定有一定影响，当干扰物浓度0.5 倍于DEHP 的含量时，测定结果并未有明显变化，当浓度达到1 倍于溶液中DEHP 的含量时就对测定结果产生加大影响，为了消除干扰物对DEHP 测定结果的影响，可对含有干扰物的样品进行预处理，通过加入正己烷，充分震荡后静置分层，去除上层清液，氮吹至干，最终甲醇定容，以去除干扰。表5 说明经过样品的预处理过程，已经基本消除溶液中干扰物对DEHP 测定的影响，并较原有值无较大变化。
表5. 干扰物对试验的影响
讨论
本试验确定饮用水中DEHP 含量测定方法的科学性和稳定性，并采用液液萃取方法去除可能存在的干扰。可作为于纯净水生产企业对邻苯二甲酸酯类化合物测定的解决方案，避免企业购买大量检测设备，有效降低检测费用与成本。整个方法干扰物以消除，影响小，并且检测限低于国家标准。
结论
该方法简便、快速，试验成本较低，适用于不具备液相、气相、气质联用实验室的DEHP的检测。能够准确测定瓶装饮用纯净水中DEHP的含量。并且具备样品前处理简单，线性范围良好，重复性好，节约分析时间等优点，具有推广价值。
