核酸提取分离方法注意事项
核酸提取分离方法
核酸提取分为传统方法和商业化试剂抽提。
传统的方法一般会采用酚/氯仿抽提及乙醇沉淀来提取核酸。
商业化试剂盒方法提取核酸，比较经典的是采用离心柱法，将硅胶膜固定在离心管中，通过离心力或者负压让液体通过硅胶膜，核酸就留在膜上。在经过洗涤、洗脱的步骤得到核酸。商业化试剂盒的应用还能避免试剂污染。
不管是传统的方法，还是商业化试剂盒方法，都需要注意下面这些问题。
温度
核酸是非常敏感脆弱的样品，所以离心机的控温性能要好，才能防止核酸降解。
离心的温度尽量维持在 4 ℃，转子的材料也要尽量选用导热性能好的材料，防止样品温度和设置的温度偏差变大。
角度与离心力
转子的设计角度， 45° 角转是比较优秀的，便于核酸的收集，还能减少样品的损失。离心力设置尽量大于 10,000 x g, 离心力越大，离心时间越短。
其他注意点
● 提取核酸的试剂会有一定的腐蚀性，为了防止试剂腐蚀转子，最好选择带 PTFE 涂层的转子，这种涂层耐酸、耐碱、耐各种有机溶剂。
● 在使用试剂盒抽提的时候，要尽量选用试剂盒专用的 Kit 转子，不需要剪盖，转子边缘采用加宽设计防止打掉离心管盖。
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