实验动物免疫方案
| 实验材料 | |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 |
用免疫学的基本理论和技术来诊断、预防和治疗疾病，并在此基础上开展的采用人工方法向机体输入由他人或动物产生的免疫效应物，如免疫血清、淋巴因子等，使机体立即获得免疫力。其特点是产生作用快，输入后立即发生作用。但由于该免疫力非自身免疫系统产生，易被清除，故免疫作用维持时间较短，一般只有2～3周。主要用于治疗和应急预防。
1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。
2、免疫方式：皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。
3、不同动物免疫所需抗原量（以蛋白免疫为例）
| >18-20kDa | <18-20kDa | |||
| 动物 | 抗原量 | 最佳抗原量 | 抗原量 | 最佳抗原量 |
| 兔子 | 20-200 | 100 | 50-400 | 200 |
| 小鼠 | 2- 40 | 15 | 4- 60 | 40 |
| 大鼠 | 10-50 | 30 | 20-150 | 50 |
| 绵羊 | 100-1000 | 200 | 200-1000 | 400 |
| 母鸡 | 20-200 | 100 | 50-400 | 200 |
| 单位：微克 | ||||
4、免疫方案（以免疫兔子为例） ：
| 天数 | 0 | 14 | 28 | 38 | 56 | 66 | 87 |
| 注射 | x | x | x | x | |||
| 采血 | 2ml | 2ml | 2+20ml | 2+50-70ml |
5、注意：
第一次免疫用完全佐剂与免疫原混合，以后加强免疫用不完全佐剂与免疫原 混合，采取多点，时间间隔式免疫法。
如果用细胞免疫兔子，那么每次免疫所需细胞量为 2-3 x 107cells。 在连续免疫完三次后，需要少量取血进行ELISA检测，检测所免疫动物的抗 体滴度，一般滴度能达到 1:10,000-50,000。在处死所免疫的动物前一周应加 强一次免疫。
如果用小鼠免疫，可以尾静脉小量采血（大约 50µ l） ，最后取眼球大量采血 （大约 500-1000µ l） ；如果用兔子免疫，可以耳缘静脉小量取血(大约 2mL)， 最后心脏大量取血(50-100mL)。
按血清制备的标准方法将血清分离，并且分装成小份，储藏在- 80oC。
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