实验动物免疫方案
实验动物免疫方案
1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。
2、免疫方式：皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。
3、不同动物免疫所需抗原量（以蛋白免疫为例）
>18-20kDa <18-20kDa
动物 抗原量 最佳抗原量 抗原量 最佳抗原量
兔子 20-200 100 50-400 200
小鼠 2-40 15 4-60 40
大鼠 10-50 30 20-150 50
绵羊 100-1000 200 200-1000 400
母鸡 20-200 100 50-400 200
单位：微克
4、免疫方案（以免疫兔子为例）：
天数 0 14 28 38 56 66 87
注射 x x x x
采血 2ml 2ml 2+20ml 2+50-70ml
5、注意：
1)第一次免疫用完全佐剂与免疫原混合，以后加强免疫用不完全佐剂与免疫原混合，采取多点，时间间隔式免疫法。
2) 如果用细胞免疫兔子，那么每次免疫所需细胞量为2-3 x 107 cells。
3) 在连续免疫完三次后，需要少量取血进行ELISA检测，检测所免疫动物的抗体滴度，一般滴度能达到1:10,000-50,000。在处死所免疫的动物前一周应加强一次免疫。
4) 如果用小鼠免疫，可以尾静脉小量采血（大约50µl），最后取眼球大量采血（大约500-1000µl）；如果用兔子免疫，可以耳缘静脉小量取血(大约2mL)，最后心脏大量取血(50-100mL)
5) 按血清制备的标准方法将血清分离，并且分装成小份，储藏在-80oC。
