对样本DNA进行定量分析的一种方法为定量PCR,其原理是利用荧光探针对产物进行标记,利用与参照DNA荧光强度的比值得到样本DNA含量。然而定量PCR往往需要绘制标准曲线,且需要参照样本作为对比,得到的DNA定量也是相对定量分析,无法满高精度的测量需求。
数字PCR原理实例
数字PCR技术就是力求做到对DNA绝对定量的技术,该技术利用对样品进行微滴化处理,使得每个微滴成为“微反应器”,进而实现“单分子模板PCR扩增”。该策略进行统计分析时,可以不依赖于标准曲线和参照样本,直接检测目标序列的拷贝数,使得检测灵敏度,精确性大大提高。因而在极微量DNA样本检测;复杂成分中微量检测;稀有突变检测等需要高精度定量分析领域具有优势。