PCR产物电泳严重拖带怎么办
1、退火温度较低,可以提高2到3度
2、Mg离子浓度一般的PCR在1.5mM就可以了,不知楼主用的多少
3、模板浓度较高或者含有其他PCR抑制剂,建议稀释下模板
4、延伸时间一般1kb/min,时间太短可能会延伸不完全
5、循环数太高也可能引起拖带,考虑平台期,30-35循环应该足够了
推荐
1、退火温度较低,可以提高2到3度
2、Mg离子浓度一般的PCR在1.5mM就可以了,不知楼主用的多少
3、模板浓度较高或者含有其他PCR抑制剂,建议稀释下模板
4、延伸时间一般1kb/min,时间太短可能会延伸不完全
5、循环数太高也可能引起拖带,考虑平台期,30-35循环应该足够了