关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

关于鞣酸化红细胞试验的红血球的相关介绍

2022.4.13

  红血球鞣化多糖、脂多糖、类脂等一些半抗原易于吸附红血球表面,所以一般醛化处理即可。但对于许多蛋白质抗原,由于不易吸附于红血球表面,所以在醛化的基础上,必须再以一定浓度的鞣酸进行处理,强化它对蛋白质的吸附能力。

  有人认为双醛化后可不必进行鞣化。首都医院做了“丙酮醛+甲醛+鞣化”和不加鞣化得出相同的抗原滴度。但多数意见认为醛化后仍需鞣化比较好。

  (1)鞣化过程:①将10%醛化红血球用生理盐水洗涤2次,再以0.15Mol/L pH7.2PBS洗涤1次,最后以PBS配成2.50%悬液;②称取优质鞣酸20mg,以生理盐水4ml配成1﹕200的浓度,于37℃水浴,使之充分溶解,然后再以pH7.2PBS稀释成1﹕2 000的浓度。当天配制、当天用完;③1份2.5%红血球悬液与1份1﹕2 000鞣酸液充分混合,37℃水浴10min,1 500r/min离心,去上清,用PBS液洗涤1次;④以0.02%牛血清白蛋白PBS液洗涤1次,最后以牛血清白蛋白PBS配成2.5%鞣化红血球。

  (2)影响鞣化的因素:①鞣酸的质量:这是很重要的,所以必须采用优质鞣酸。分析纯的鞣酸呈面包屑状,不呈面粉状,有折光性;②鞣酸的浓度:浓度过高,可以出现红血球的凝集现象;浓度过低,达不到红血球的活化作用。醛化过的红血球所采用的鞣酸浓度一般比新鲜红血球高10倍。通常以1:2 000为佳;③鞣化时间:鞣化过程一般10min~15min即可完成。时间再长也不能吸附更多的抗原,提高血凝滴度。鞣化时采用的pH对吸附抗原和血凝滴度影响不大,一般采用pH7.2的PBS液。

推荐
关闭