拟南芥基因组DNA的提取
实验概要
本实验介绍了用CTAB法提取拟南芥基因组DNA。
主要试剂
CTAB提取液(2%CTAB,50mMEDTA,50mM Tris-HCl,PH 8.0,0.84M NaCI,0.05%巯基乙醇),氯仿,无水酒精,70%的酒精
主要设备
1.5 mL离心管,65℃水浴锅,高速离心机,研钵
实验材料
拟南芥叶片
实验步骤
1. 取植物叶片1-2片,加入0.4mL CTAB提取液,研磨至均匀。
2. 将研磨好的溶液移入1.5 mL离心管中,放在65℃水浴锅中水浴45分钟。
3. 加入等体积的氯仿抽提,12000rpm离心5分钟。
4. 取上清,加入2倍体积的无水酒精,混匀后离心。
5. 弃上清,加入70%的酒精洗涤。
6. 短离心去除酒精,晾干后加入适量水溶解。
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