关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

蛋白质微阵列如何制作?

2022.4.25

构建蛋白质阵列文库的第一步是建立全长cDNA表达文库,再将cDNA文库转化成蛋白质文库。原则上所有cDNA都可以用于蛋白质文库的构建,然而大多数蛋白质因不具备体外可检测的生物活性,因而不适于文库筛选。能适用于体外高通量功能筛选的蛋白质主要有细胞膜“表面蛋白”和“分泌型蛋白”。

大部分分泌型蛋白质在氨基末端含有20至40个氨基酸的信号肽。而膜蛋白均含有跨膜疏水性的α螺旋结构。利用计算机程序可以预测这两类蛋白,从而挑选相应的cDNA构建蛋白质阵列文库。一旦cDNA文库确定后,可将cDNA克隆到表达标记蛋白的载体内,应用高通量自动化的蛋白表达系统来表达和纯化带有标记的靶蛋白。

推荐
热点排行
一周推荐
关闭