粘粒和质粒克隆的纯化实验
文库一旦包装就应该尽快进行扩增,它可以大大增加文库的拷贝数,但在扩增时由于克隆的生长速率不同,文库的组成可能会出现某种潜在的改变。这种文库克隆组成比率的变化可以通过把文库克隆预吸附到细菌上并使用一种高密度铺平板和短期培养的方法而尽量减少。
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 通过原位杂交检测硝酸纤维索滤膜上影印菌落。
5. 对照次级平板的放射自显影结果,挑选独立的阳性克隆,培养扩增后分离质粒或粘粒的DNA。 |
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文库一旦包装就应该尽快进行扩增,它可以大大增加文库的拷贝数,但在扩增时由于克隆的生长速率不同,文库的组成可能会出现某种潜在的改变。这种文库克隆组成比率的变化可以通过把文库克隆预吸附到细菌上并使用一种高密度铺平板和短期培养的方法而尽量减少。
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 通过原位杂交检测硝酸纤维索滤膜上影印菌落。
5. 对照次级平板的放射自显影结果,挑选独立的阳性克隆,培养扩增后分离质粒或粘粒的DNA。 |