实际上，科学家们在使用 UPLC ® 时都会因为增加了分离度和较高的色谱波峰间隔而折衷选择流量，因此方法的稳健性更强。由亚 2 微米颗粒物质获得的色谱效能增加与 UPLC 要求的较短的色谱柱长度相结合，会产生较尖锐、同时更加集中的波峰，从而简化了试验过程，例如在生物分析法中。质谱学会已经利用增加的灵敏度和更短的分析时间来提高 UV 和 LC/MS 试验的灵敏度。
为了实现这些亚 2 微米颗粒的色谱效能，必须仔细控制柱前和柱后的谱带增宽，这对于恒溶剂模式（ isocratic mode ）下的运行尤为重要。 ACQUITY 超效能 LC ® 系统专门设计用于开发可由亚 2 微米颗粒 LC 获得的色谱效能，柱前容量约为 80 微升，且色散性极低。没有这种严格的控制，波峰形状就会受到破坏，从而导致较宽的拖尾峰。
图 3A 所示为由硅硫平杂质法向亚 2- 微米颗粒（ 2.1 毫米 x 100 毫米 ， 1.7 微米） C 18 UPLC 法的过渡。其中，我们发现分析时间已经减少至仅 20 分钟，而峰分辨率也已经降低。主峰周围的小杂质显示清晰，且主 API 峰的分辨率与 HPLC 分离法的不分上下。由 HPLC 移向 2.1 毫米 UPLC 色谱柱时，由于 2.1 毫米 色谱柱的分析时间更快且体积流速更低，节省溶剂的量确定为 82% 。假设 HPLC 系统在一年 52 个工作周内每周工作 5 天、每天工作 20 小时，仪器将在这段时间内进样 4477 次，消耗掉 419 升 溶剂。
与 UPLC 系统相比，后者进样相同的次数会消耗 71 升 流动相。当流动相为 50% 左右的乙腈时，在整个分析过程中就可以节省 174 升 乙腈，成本按 100 美元 / 升计算， 每年节约财务支出 17,000 美元 。
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图 3. 奎硫平及其杂技的 UPLC 逆相分离。 3A . 2.1 毫米 色谱柱 I.D. 3B. 1.0 毫米 色谱柱 I.D.
ACQUITY UPLC 系统的独特设计最大限度地减小了系统的延迟体积和系统的分散度，支持使用填充有亚 2 微米物质的 1.0 毫米色谱柱 。图 3B 中所示的数据表明在 ACQUITY UPLC BEH C 18 1.0 毫米 x 100 毫米， 1.7 微米色谱柱上进行的相同的奎硫平杂质分析。样品是在相同的梯度条件下洗提的，其流速大小为 0.181 毫升 / 分钟；这表示溶剂用量比 2.1 毫米 HPLC 分离法减少 77% 。因此，若每年同样要进行 4477 次进样， 1.0 毫米分离只会消耗 16.30 升 溶剂，因此仅消耗 8.15 升 乙腈，溶剂用量 减少 97% 。与 HPLC 分析法相比， 1.0 毫米 UPLC 分析只需 800 美元购买乙腈的成本，相当于进行相同次数的分析 比 HPLC 法节省 20,000 美元 。图 4 所示的数据说明与辅助显像法（ aid visualization ）相比 UPLC 在 1.0 毫米和 2.1 毫米规模下溶剂和成本的节省情况。通过该数据得知， UPLC 不仅更加高产，而且更加经济，因为该方法每年可以少消耗数百升溶剂。
结论
可商购的亚 2 微米颗粒 LC 色谱柱的出现及可利用这些色谱柱的色谱潜力的仪器使色谱工作人员和 LC/MS 科学工作者能够提高其分析工作的灵敏度、质量和速度。 ACQUITY UPLC 系统的独特设计使科学工作者能够以一种比以往更高效的方式取得这些成果。系统不仅更加高效，还比 HPLC 或“快速 LC ”（采用 4.6 毫米 色谱柱，流速更高）或单片固相显著减少溶液用量。本白皮书所示的实例说明，通过迁移至 2.1 毫米 规模的 UPLC 法，可节省溶剂 82% ；通过迁移至 1.0 毫米 规模的 UPLC 法，可 节省溶剂 97% ，累计每年可节省数万美元。
这样的成本节约具有重要的商业意义，使用更少的溶剂和产生更少的废物有益于环境保护。
分析时间
流动相
乙腈
成本
节约额
溶剂用量与 HPLC 和 UPLC 成本对比
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图 4. UPLC 在 1.0 毫米 和 2.1 毫米 色谱柱下相对 HPLC 的溶剂和成本节约情况。
