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正相色谱法与反相色谱法比较

2023.9.22

(1)定义:正(反)相色谱法是流动相极性小(大)于固定相极性的液相色谱法。(2)固定相:正相色谱法使用极性固定相,如氰基、氨基键合相;反相色谱法使用非极性固定相,如C18、C8、苯基、二醇基键合相,或使用极性大的流动相,使用氰基、氨基键合相。(3)流动相:正相色谱法的流动相为烷基加适量极性调节剂;反相色谱法的流动相一般以水作为基础溶剂,加入甲醇、乙腈等有机溶剂调节极性。水相可以含有缓冲盐,可以加入酸或碱调节pH值。(4)应用范围:正相色谱法一般用来分离极性较大的化合物;而反相色谱法用来分离极性小或中等极性的化合物。(5)流动相极性对洗脱顺序的影响:在正相色谱法中,增加流动相的极性,如在正已烷-乙醇体系中,增加乙醇的比例,组分的tR减小、k减小;在反相色谱法中增加流动相的极性,如在甲醇-水体系中,增加水的比例,则组分的tR增大、k增大。(6)组分的极性与洗脱顺序的关系:在正相色谱法中,极性大的组分tR大、k大;在反相色谱法中则正好相反,极性大的组分tR小、k小。

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