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分子生物学分型法有哪些?

2021.3.24

(一)RFLP与PCR-RFLP分型法 

限制性片段长度多态性(RFLP)分析,称为DNA-RFLP。

DNA片段进行体外扩增,然后再用限制性内切酶进行酶切分析,可使限制性长度分析的敏感度增加,此类方法称为PCR-RFLP分型法。PCR-RFLP分型法所应用的PCR引物为HLA组特异性的,此法特别适应于小量标本的研究和异基因骨髓移植供者的选择。 

(二)PCR-SSO分型法 

是PCR与杂交相结合的技术,从而对扩增产物作出HLA型别判断。

PCR-SSO是Ⅱ类HLA分型应用最广泛的方法,能鉴定所有已知序列的HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP等位基因。

基因芯片是与PCR-SSO结合应用于HLA分型,可使分型趋于规模化和自动化,尤其在HLA多态性和疾病遗传背景分析等方面更具优势。

(三)PCR/SSP分型法 

应用HLA等位基因的序列特异性引物(SSP),对待测DNA进行PCR扩增,从而获得HLA型别特异性的扩增产物。

(四)PCR-SSCP分型法 

单链构象特异性-聚合酶链反应(PCR-SSCP),是以待测基因PCR扩增为基础,对扩增的DNA单链(ssDNA)的HLA分型方法。

(五)SBT分型法 

基于序列的HLA分型法(SBT),可通过对扩增后的HLA基因片段进行的核酸序列测定判断HLA型别。


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