临床微生物学标准菌株的管理
标准菌株的管理
（1）供应商的选择
选择有资质的标准菌株合格供应商，每批标准菌株必须附带有供应商的合格证或检测报告或说明书，来证明所采购的标准菌株是合格的。
（2）标准菌株和验收
实验室收到标准菌株，首先应进行符合性感官检查，记录菌株号和标准菌株来源途径信息，确保溯源性清楚。同时还应记录标准菌株名称和数量、生产日期、接收日期和有无破损等情况。
（3）冻干标准菌株的复苏
购回的标准菌株一般为冻干粉剂，依照随产品附有的菌种复活方法，在相应的生物安全水平下打开包装，选择合适的培养基和培养条件（根据生产商说明或有关技术通则）进行复活。冻干菌株的传代次数不得超过5代。
（4）菌株性能的确认
①纯度检查（观察菌落形态）:取复活后的培养物，在相应的鉴别平板或非选择平板上划线分离，培养出单菌落，观察菌落形态是否符合该菌株要求，同一平板上的单菌落大小、形状、颜色、质地和光泽是否相似，对于出现两种以上形态的菌株，应再分别挑取单菌落划线，检测是否出现相同特征。
②细胞形态:取划线平板上的单菌落，革兰染色反应应符合要求，且呈现一致性。
③必要时进行生化鉴定
④污染处理:如发现菌株有污染，挑选目标菌培养成功后，将培养物灭菌销毁（121℃，30分钟）。
（5）标准菌株的保存
保存菌种的方法应根据菌种的类型和保存目的进行选择，一般包括以下几种方法:
①一般保存方法:用高层琼脂保存，使细菌处于代谢缓慢状态，并按照各种细菌生长的情况作定期移种。此方法是最简单的保存方法，不需要特殊设备，并可随时提供使用，最长可保存1年。但细菌经多次移种后，性状可能发生变异。
②低温冷冻保存方法:取对数生长期的细菌混悬于小牛血清或无菌脱纤维羊血0.5～1.0ml中，容器中加入无菌玻璃珠数枚，存于-40℃低温冰箱中保存。需要时用无菌镊子取出一枚玻璃珠置培养基中，即可获得新鲜菌种。大部分细菌用此方法可保存6～12个月，甚至更长时间。应注意:标准菌株保存管一经融化使用后，不得再次冻存。
③冷冻干燥法:是菌种保存最佳方法，可以免去细菌因频繁传代而造成的菌种污染、变异和死亡。此法需冷冻干燥设备，操作较费时，但适用于需要长期保存的菌种。
菌株保存的注意事项:①不能用含有可发酵性糖的培养基保存菌种；②不可以使用选择性培养基，不能从药敏试验平板培养基上留取菌株；③不得使培养菌干枯，所有试管要保持良好的密封性；④对温度变化敏感的细菌，如淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌，不可贮存于冰箱，但可用快速冷冻干燥法长期保存；⑤作为抗菌药物敏感试验用的标准菌株，由保存状态取出后，不能连续使用1周以上，应定期传代，一般不超过6次，必要时进行更换。
（6）标准菌株的期间核查
标准菌株的期间核查频率为每半年一次；工作菌株期间核查的方法同菌株的性能确认方法；同时建立标准菌株期间核查记录。
（7）标准菌株的废弃
标准菌株如已老化、退化、或变异、污染等，经确认试验不符合的或该菌种已无使用的应及时销毁。废弃的标准菌株由部门负责人批准，使用人员放入121℃高压锅内，高压灭菌45分钟后作为废弃物处理。
（8）记录
实验室应记录标准菌株的配制、复活、传代和确认等工作内容并定期交文档管理员存档。
