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茚三酮法定性定量检测丝氨酸介绍

2022.11.15

随着人们对丝氨酸生理作用的深入认识和医药保健事业的不断发展,医药、食品、饲料等行业对丝氨酸的需求量正迅速扩大。虽然L-丝氨酸属于非必需氨基酸,但它却具有许多重要的生理功能及用途,在医药、食品、化妆品中均有较为广泛的应用。因此,测定混合氨基酸中丝氨酸的含量对丝氨酸的开发利用具有重要意义。α-氨基酸与茚三酮在弱酸性溶液中共热,反应后经失水脱羧生成氨基茚三酮,再与水合茚三酮反应生成紫红色或蓝色物质 。

脯氨酸等仲胺氨基酸与茚三酮反应生成黄色物质。丝氨酸和茚三酮在弱酸性条件下共热可以生成紫红色的缩合物质,且其颜色随着丝氨酸的含量变化而有所不同为了快速简便地检测氨基酸水解液中丝氨酸的含量,有研究提出了一种基于氨基酸纸上层析的改进茚三酮显色法,并将其应用于难以分离的氨基酸的检测。首先,将茚三酮加入到展层剂中,再对氨基酸混合液进行层析。

在一定条件下将层析后的茚三酮与氨基酸进行显色反应,根据不同颜色即可鉴别丝氨酸。然后,对不同剂量的丝氨酸标准液使用上述方法绘制丝氨酸标准液的吸光度-含量的标准曲线,用以计算氨基酸水解液丝氨酸的含量。结果表明:茚三酮法定性定量检测丝氨酸的最佳实验条件为溶液pH在4.5左右,显色剂用量为每10mL展层剂中加入2.5mL0.1%茚三酮,并在105℃下加热5min。


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