液-固色谱法技术原理
一. 原理
液-固色谱法” 是利用各组分在固定相上吸附能力的不同而将它们分离的方法。
当组分随着流动相通过色谱柱中的吸附剂时，组分分子及流动相分子对吸附剂表面的活性中心发生吸附竞争。组分分子对活性中心的竞争能力的大小决定了它们保留值的大小。被活性中心吸附越强的组分分子越不容易被流动相洗脱，k值
就大；反之k值就小。组分之间的k值相差越大，分离越容易。
吸附剂吸附能力的强弱与吸附剂的比表面积、物理化学性质、组分分子的结构和组成以及流动相的性质等因素有关。
二. 固定相
液-固吸附色谱所使用的固定相，多数是有吸附活性的吸附剂，常用的有表面多孔型和全多孔微粒型硅胶、氧化铝、分子筛等。
1. 表面多孔型：又称薄壳型，是高效液相色谱使用的第一种填料。表面多孔填料的机械强度好，易填充均匀、紧密，渗透性好，表面孔隙浅，传质快，柱效高，分离速度快。其主要缺点是由于比表面积小，柱容量低，允许进样量小。
2. 全多孔微粒型：目前广泛使用的有球形和无定形两种，颗粒直径3～10um，它具有粒度小，比表面积大（100～600m2／g），孔穴浅，柱效高和柱容量大的优点。
三. 流动相
实现最佳分离与流动相的选择有关。溶剂的极性是重要的依据。溶剂的极性强弱可用溶剂强度参数 e0 来衡量。 e0 越大，表示洗脱剂的极性越强。
吸附色谱流动相的选择原则是极性大的试样需用极性强的洗脱剂，极性弱的试样宜用极性较弱的洗脱剂。实际工作中常用两种或两种以上溶剂按不同比例混合作洗脱剂，以提供合适的溶剂强度和 k 值，提高分离的选择性。在分离复杂试样时，可进行梯度洗脱，能提高分离效率，改善峰形，加快分析速度。（高效液相色谱法中，流动相选择虽然有一般的指导原则，但主要靠实践经验。）
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