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结核杆菌的检测

2019.11.11

结核杆菌与麻风杆菌是分枝杆菌属中的主要病原菌。

结核杆菌菌体细长略带弯曲,有分枝生长趋势。

菌体含脂量高,与其抗酸特性、抵抗力特性、致病性与免疫  性等都有密切关系。

该菌营养要求高,生长缓慢,形成“菜花状”菌落。

一、结核杆菌检验程序

结核病人病灶中查到结核杆菌,是病原学诊断的重要依据,根据感染部位不同,可采集病人的痰、尿、粪便、脑脊液、胸腹水、胃液等,按以下程序进行检验。

二、结核杆菌培养特性

  1. 液体培养基(苏通氏培养基、小川培养基、血清酸性培养基等)结核杆菌生长表现:标本材料经前处理(即酸碱处理,可液化标本,也可杀死杂菌,还可浓缩集菌)后接种液体培养基,35℃培养1-2周,由于表面生物,可在培养基表面表成污灰、干燥、有皱褶的菌膜。

2. 固体培养基(改良罗氏培养基、丙酮酸钠培养基等)结核杆菌生长表现:标本材料经前处理后,接种固体培养基,37℃培养2-4周,在培养基表面可形成乳白或米黄色、不透明、粗糙颗粒状或节状堆聚的菌落,呈现“菜花状”。

3. 结核杆菌快速培养检测方法:无菌手续将前处理后的材料涂片,置液体培养基中,35℃恒温箱CO2培养箱内培养,3-5日后,每隔日取出一玻片,染色镜检,可快速获得结果。

三、齐一尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法(操作)

【原理】

结核杆菌对苯胺染料不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,再经美兰复染,结核杆菌及其他分枝杆菌仍呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。

【材料】

  1. 结核病人痰液:采取清晨第一口粘痰,或浓缩集落菌法处理过的痰标本。

2.抗酸染色液

3. 载物玻片、玻片夹、酒精灯、腊笔等。



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