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34招教你学会实验室常用贮存液的配制(二)

2020.2.16

  11 1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液

  『配制方法』

  用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃.

  〖注意〗

  DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理.

  12 脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液

  『配制方法』

  把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃.

  13 0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液

  『配制方法』

  在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠,在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用.

  〖注意〗EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解.

  14 溴化乙锭(10mg/ml溶液)

  『配制方法』

  在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温,

  〖注意〗

  溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩.

  15 2×HEPES缓冲盐溶液

  『配制方法』

  用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4、0.2g葡聚糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH调节pH值至7.05,再用蒸馏水定容至100ml. 用0.22μm滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃.

  16 IPTG溶液

  『配制方法』

  IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238.3),在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃.

  17 1mol/L乙酸镁溶液

  『配制方法』

  在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L过滤除菌.

  18 1mol/L MgCl2溶液

  『配制方法』

  在800ml水中溶解203.4g MgCl2‘’6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用.

  〖注意〗

  MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放.

  19 β-巯基乙醇(BME)溶液

  『配制方法』

  一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4℃.

  〖注意〗

  BME或含有BME的溶液不能高压处理.

  20 NBT溶液

  『配制方法』

  把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃.


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