34招教你学会实验室常用贮存液的配制(二)
11 1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液
『配制方法』
用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃.
〖注意〗
DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理.
12 脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液
『配制方法』
把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃.
13 0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液
『配制方法』
在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠,在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用.
〖注意〗EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解.
14 溴化乙锭(10mg/ml溶液)
『配制方法』
在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温,
〖注意〗
溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩.
15 2×HEPES缓冲盐溶液
『配制方法』
用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4、0.2g葡聚糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH调节pH值至7.05,再用蒸馏水定容至100ml. 用0.22μm滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃.
16 IPTG溶液
『配制方法』
IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238.3),在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃.
17 1mol/L乙酸镁溶液
『配制方法』
在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L过滤除菌.
18 1mol/L MgCl2溶液
『配制方法』
在800ml水中溶解203.4g MgCl2‘’6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用.
〖注意〗
MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放.
19 β-巯基乙醇(BME)溶液
『配制方法』
一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4℃.
〖注意〗
BME或含有BME的溶液不能高压处理.
20 NBT溶液
『配制方法』
把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃.