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利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达(三)

2020.5.05

细胞混合结果

在本次实验中,我们在一个96孔板里混合了多种细胞,保证每个孔大约50,000个细胞。因此,如果是1:1混合,那么每种细胞会有25,000个。如果是1:1:1混合,那么每种细胞将有16,700个。实验板分别用480/510nm(AsGFP和ZsGreen的优化结果)和550/588nm(DsRed设置)的激发和发射来检测。观察到的RFU值与预测值接近。结果总结如下。结果显示,AsGFP和ZsGreen可以和DsRed一起检测,反之亦然。(见图表4)

结论

Molecular Devices公司的荧光功能微孔板读板机可以检测完整贴壁细胞中的荧光蛋白。波长扫描可调的功能可以优化每一种独特荧光染料的波长结果。底读模式提供最佳检测灵敏度,顶读模式也可以提供可利用的数据,尤其是对含有ZsGreen和DsRed的细胞系。

顶读模式检测DsRed细胞系时,可以通过替换无色培养基来达到优化实验结果的目的。


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