人血清中白蛋白与球蛋白的分离
随着超速离心机转速的提高，用超速角式转头分离人血清中白蛋白与球蛋白的离心时间越来越短，用5—20％线性蔗糖梯度作蛋白质速率—区带（Rate—zonal）分离，样品以近等速沉降，低于分析实验结果。下面的简单分离实例有代表性。
设备：
离心机：智能型超速离心机（Hitachi CP—M系列，Beckman L—XP系列）
转头：定角：P90AT，P80AT，比较实验转头：P40ST
P90AT: 90,000rpm, 700,000xg, 8×12ml K=25
P80AT: 80,000rpm, 615,000xg, 8×12ml K=27
P40ST: 40,000rpm, 284,000xg, 6×13ml K=139
离心管：12ml及13ml PA管
样品：标准人血清1 ml （2.5mg/ml），用0.15M NaCl溶解。
梯度液：5—20％ 线性蔗糖梯度， P90AT及P80AT梯度液量约9.5ml ，P40ST梯度液量约9.6ml。
方法：5—20％蔗糖梯度液上铺约1ml 人血清，对 P90AT及P80AT必须装满（用血清调节），P40ST加样至距管口3mm。
离心参数：
P90AT：90,000rpm，2小时，2.5小时，3小时，5℃，加速“5”减速“5”
P80AT：80,000rpm，2小时，2.5小时，3小时，5℃，加速“5”减速“5”
P40ST：40,000rpm，14小时，16小时，18小时，5℃，加速“8”减速“8”
曲线绘制：用日立DGF—U 梯度仪通过上口连续取样至带流动池分光光度计连续测O.D.（280nm）后收集。
结果及分析：
转头 | 白蛋白峰顶距离从管口算起的容量（ml） | 球蛋白峰顶距离从管口算起的容量（ml） | ||||
P90AT | 2小时 | 2.5小时 | 3小时 | 2小时 | 2.5小时 | 3小时 |
4.5 | 5.7 | 6.8 | 6.2 | 7.9 | 9 | |
P80AT | 4.3 | 5.5 | 6.6 | 6 | 7.6 | 8.7 |
P40ST | 14小时 | 16小时 | 18小时 | 14小时 | 16小时 | 18小时 |
3.6 | 4.1 | 4.7 | 5.0 | 5.8 | 6.6 |
转头 | 白蛋白峰顶在蔗糖梯度位置％ | 球蛋白峰顶在蔗糖梯度位置％ | ||||
P90AT | 2小时 | 2.5小时 | 3小时 | 2小时 | 2.5小时 | 3小时 |
10.0 | 11.7 | 13.2 | 12.7 | 14.7 | 16.7 | |
P80AT | 9.9 | 11.6 | 13.0 | 12.5 | 14.5 | 16.5 |
P40ST | 14小时 | 16小时 | 18小时 | 14小时 | 16小时 | 18小时 |
7.5 | 8.3 | 9.0 | 9.9 | 11.0 | 12.0 |
分析：根据以上结果，可以看出：
1．在5—20％蔗糖线性梯度中白蛋白与球蛋白基本上以等速沉降
2．用P40ST或P80AT转头分离人血清白、球蛋白在最高转速离心2.5小时效果最佳，用P40ST转头离心18小时效果最好。
3．用P40ST转头分离的结果O.D. 对离心管从管口算起容量曲线的峰形比P90AT的峰形尖锐一些，但考虑到离心机和转头的寿命，用P80AT 转头离心性价比最佳。
