稀释接种法测定BOD方法的操作步骤
步骤
（1）水样的预处理
①水样的pH若超出6.5～7.5范围时，可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调节pH近于7，但用量不要超过水样体积的0.5％。若水样的酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或酸液进行中和。
②水样中含有铜、铅、锌、镉、铬、砷、氰等有毒物质时，可使用经驯化的微生物接种液的稀释水进行稀释，或提高稀释倍数以减少毒物的浓度。
③含有少量游离氯的水样，一般放置1～2 h，游离氯即可消失。对于游离氯在短时间不能消散的水样，可加入亚硫酸钠溶液除去。其加入量由下述方法决定：取已中和好的水样100 ml，加入（1＋1）乙酸10 ml，10％碘化钾溶液1 ml，混匀以淀粉溶液为指示剂，用亚硫酸钠溶液滴定游离碘。由亚硫酸钠溶液消耗的体积，计算出水样中应加亚硫酸钠溶液的量。
④从水温较低的水域或富营养化的湖泊中采集的水样可遇到含有过饱和溶解氧，此时应将水样迅速升温至20 ℃左右，在不使满瓶的情况下，充分振摇，并时时开塞放气，以赶出过饱和的溶解氧。从水温较高的水域或废水排放口取得的水样则应迅速使其冷却至20 ℃左右，并充分振摇，使与空气中氧分压接近平衡。
（2）不经稀释水样的测定
①溶解氧含量较高、有机物含量较少的地表水，可不经稀释而直接以虹吸法将约20℃的混匀水样转移入两个溶解氧瓶内，转移过程中应注意不使产生气泡。以同样的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许，加塞。瓶内不应留有气泡。
②其中一瓶随即测定溶解氧，另一瓶的瓶口进行水封后，放入培养箱中，在20 ℃±1 ℃培养5d。在培养过程中注意添加封口水。
③从开始放入培养箱算起，经过五昼夜后，弃封口水，测定剩余的溶解氧。
（3）需经稀释水样的测定
①稀释倍数的确定。根据实践经验，提出下述计算方法，供稀释时参考。
（i）地表水：由测得的高锰酸盐指数与一定的系数的乘积，即求得稀释倍数，见表1。
（ii）工业废水：由重铬酸钾法测得的COD值来确定，通常需作三个稀释比。使用稀释水时，由COD值分别乘以系数0.075，0.15，0.225，即获得三个稀释倍数。使用接种稀释水时，则分别乘以0.075，0.15和0.25三个系数。
②稀释操作。
（ii）一般稀释法。按照选定的稀释比例，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀释水（或接种稀释水）于1000 ml量简中，加入需要量的均匀水样，再加入稀释水（或接种稀释水）至800 ml，用带胶板的玻棒小心上下搅匀。搅拌时勿使搅棒的胶板露出水面，防止产生气泡。
按不经稀释水样的测定相同操作步骤进行装瓶、测定当天溶解氧和培养5d后的溶解氧。另取两个溶解氧瓶，用虹吸法装满稀释水（或接种稀释水）作为空白试验，测定5d前后的溶解氧。
（ii）直接稀释法。直接稀释法是在溶解氧瓶内直接稀释。在已知两个容积相同（其差＜1 ml）的溶解氧瓶内，用虹吸法加入部分稀释水（或接种稀释水），再加入根据瓶容积和稀释比例计算出的水样量，然后用稀释水（或接种稀释水）使刚好充满，加塞，勿留气泡于瓶内。其余操作与上述一般稀释法相同。
BOD5测定中，一般采用叠氮化钠改良法测定溶解氧。如遇干扰物质，应根据具体情况采用其他测定法。
