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细胞色素试剂盒的使用方法和注意事项

2021.5.26

 细胞色素试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联吸附试验(ELISA)。往预先包被人细胞色素C(Cyt-C)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的人细胞色素C(Cyt-C)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

 

  细胞色素试剂盒的使用方法:

  1、样品处理:

  ①液体食品:取约30m1样品置于烧杯中,加热除去酒精或二氧化碳,备用。

  ②固体食品:称取捣碎的样品约10克,置于烧杯中,加30m1水,摇匀后过滤,滤液备用。

 

  2、测定:取一烧杯,加入处理后的样品液10m1,加入检测液A5滴,摇匀;用PH试纸沾取烧杯内的液体检查PH值是否在8-9之间,如未到,再滴入检测液A调整到PH值在8-9之间,然后加检测试棉B少许,令其浸入液体中,在90-100℃的水浴中加热,1分钟后搅拌试棉并将液体中的检测试棉B取出,用清水漂洗试棉,如试棉染上的颜色不褪的为非食用色素。为便于判断,可取检测试棉B少许,用水浸湿后对比观察。

 

  细胞色素试剂盒的注意事项:

  1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

 

  2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

 

  3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

 

  4、请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数后再测定,计算时请乘以总稀释倍数。




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