细胞消化过度会对流式凋亡实验有影响吗
因为是诱导凋亡的实验，细胞加药处理后，贴壁细胞会因为活力丧失而脱壁漂浮，而这部分细胞正是你需要的，所以加药处理完后要收集全部培养上清，少量PBS洗瓶内剩下的细胞，洗的PBS与之前收集的上清合并。胰酶消化。消化完毕用之前收集的培养基中止消化。离心后PBS再洗一遍。离心，弃上清，细胞沉淀中加入70% 4度预冷的乙醇（PBS配制），4度放置不少于1小时（有的文献说是不少于15分钟）。之后离心去乙醇，PBS洗一遍后加入PI和DNAse，终浓度50 ug/ml，混匀，避光室温放置30 min后即可上流式细胞仪测定。
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