哺乳动物中制备基因组DNA实验
制备DNA
| 实验材料 | 动物组织 |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | PBS 乙酸铵 乙醇 酚 氯仿 异戊醇 TE |
| 仪器、耗材 | 离心机 摇床 研钵 |
| 实验步骤 |
1. 切下组织并立即剪成小块，置于液氮中冻结。
2. 将200 mg~1 g 的组织用预冷的研钵和研杵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每100 mg 组织用1. 2 ml 消化缓冲液悬浮。 3. 500 g 离心细胞5 min，弃上请。贴壁生长细胞先用胰酶消化。
6. 将样品在盖紧的管中于50℃摇荡下温育12~18 h。
7. 用等体积的酚/氯仿/异戊酵抽提样品，1 700 g 离心10 min。
10. 加入1/2体积7.5 ml 乙酸铵和2体积100%乙醉，1 700 g 离心2 min。
11. 用70%乙酵洗涤，晾干，沉淀用TE。
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| 注意事项 |
1. 如果是用肝组织，要除去胆囊，因其含有高水平的各种消化酶。
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