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如何用紫外分光光度计测细胞密度

2021.11.03

首先培养一定浓度的纯藻液,再将藻液用培养液调整浓度为原液,十分之八原液,十分之六原液,十分之五原液,十分之三原液,大概五个点,分别涂布计数,测OD(一般是600)。得出在你培养下藻液的细胞浓度与OD之间关系的一元一次方程。以后培养藻液后,直接测OD,按照方程就可以得出藻液浓度了。自查朗伯比尔定律。具体实验设计就本科甚至高中生都知道的,想办法拿到标准曲线就是,比如拿干重、某种生物活性、甚至直接涂布计数等作为参照。但前提是,样品中不可以有除待测微生物之外的、能够造成溶液浑浊的物质,否则就不准了。用10cm dish,一般是我一瓶(T25)293T细胞长满后,接到10cm dish中,然后让其长一天,那个时候基本就能转染了,这是经验,不过293T状态不一样的话,可能会有微小差别,一般293T长得还是很快的,一天基本能传一代(1传3,一天基本就能长到80,90%),而且在转染过程中,293T还会长的,到最后,整个皿全铺满了细胞,所以在转染的时候细胞多一点少一点影响还是不是很大(70,80,90)都行,不过不要太多,太多最后细胞都叠起来了。这个凭肉眼还是不好看,凭经验吧,包毒效果好的比例就行,因为细胞状态可能不一样。凭着经验,跟周围的人学习几次,就可以把握了,80%就是细胞占到了80%,中间留着空隙。

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