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实验小鼠运输指南(一)

2020.4.08

大家好,我是一只来自邦耀实验室SPF级动物房的基因编辑小鼠,听实验室的哥哥姐姐们说现在外面已经30多度的高温了,在外面呆几分钟就能汗流浃背。虽然我没有汗腺,但是光想象一下就觉得鼠生艰难啊…不过上完最后一节课就要放暑假,去一个新的环境、参与完成一项伟大的实验了~但是我们中有的是短途货车出行,有的是长途跨省出行,据说这其中还有很多学问呢!求知欲强的我决定好好查阅文献科普一下。

小鼠作为最重要的模式生物之一,近年来需求量越来愈大,特别是随着基因编辑技术的发展,使得基因修饰的小鼠成为了科研的必备工具,各个科研单位之间合作交流日益广泛,使得小鼠运输需求不断增多,其中既包括第三方机构定制的模型鼠,科研合作者赠送的动物,甚至不乏来源于国外的实验动物。然而实验动物运输会遇到诸多问题,如运输后小鼠体重骤减,皮毛粗糙无光泽,食欲下降,甚至出现意外死亡等现象,这都让我们科研者心疼不已。运输造成的影响不仅妨碍实验动物的身心健康、降低其福利水平,且干扰实验对象的一致性,对获得的实验数据造成影响,因此实验动物的运输问题值得我们重视起来。

01 首先,必须重视实验动物运输与福利

关于实验动物运输与福利,国际上早有明确的运输规定,规定内容包括了对动物运输车辆、运输物种、生理阶段、年龄和性别、运输时间、食水供应、福利保障等,以及对于动物运输前准备、运输过程中的防护以及人员培训等方面都提出了一些要求和规范:

  1.  如AVMA 要求在动物运输过程中有专业人员陪同,对于相关人员需提供专业培训等[1];

2.  AAALAC指南Guide 中,单独列出动物运输章节,对于动物运输前准备、运输过程中的防护和福利保障以及人员培训等方面都提出了一些要求和规范;

3.   国际兽医局对于动物运输中动物的饮水、食物和运输包装盒、安全等方面也有明确的规定和指导[2];

4.   国内在动物运输方面的法规相对起步晚,但目前已经有很多相关法规对动物运输设备,工具及饮食等方面作出了要求。

02 了解小鼠运输过程的应激反应

何为应激?即在运输过程中因为外界因素的刺激导致实验动物出现不适反应的情况。

引起因素:如运输过程中的装卸、运输时间、禁食禁水、运输笼盒、环境温度等外界条件造成小鼠出现恐惧与疼痛、饥渴、疲劳、通风不良、过度拥挤等,进而引发动物发生的应激反应。

表现症状:动物应激反应会表现为体重下降、攻击性加强、心跳和呼吸频率加快、脱水及对疾病的抵抗力降低,严重时可影响动物的质量,甚至导致动物在运输途中衰竭死亡。并且在不同运输阶段会有不同变化:

●  运输初期:在恐惧、疼痛、关禁、拥挤等应激因子的刺激下,表现不安、狂躁和敏感性增高,或畏缩、颤抖和咬包装盒(箱)等;

●  运输后期:逐渐适应后,动物安静下来、对环境表现出冷漠,对正常刺激不反应等;

●  运输结束后:动物饮食饮水减少或废绝、疲乏衰弱、腹泻或排便减少、脱水,若仔受刺激,甚至导致疾病无法恢复、死亡等。

举例:体重下降

Sunghak Lee等人以676只3-9周的大小鼠为研究对象,在最优的条件下(规定的温度,装载密度及运输环境等)运输时间约为24h(包括自打包小鼠--拆包装的时间),小鼠平均体重下降约0.9%,而大鼠会更加敏感,平均体重会下降3.71%。多种小鼠品系之间C57BL/6小鼠变化最为明显,与ICR小鼠下降0.5%相比,C57BL/6平均下降4.69%。提示近交系小鼠相比封闭群小鼠对于应激更加敏感。文章也提到运输引起的体重下降是不可避免的,不过一般大小鼠体重下降约5%是没有太大影响,如果运输时间长、路途远、包装密度大体重消耗可能达到10-15%左右,需要注意。



大小鼠运输过程中体重变化[3]

除了体重,还有一些不易被观察到的生理变化:

如研究表明,短途运输会引起小鼠代谢、神经内分泌系统和免疫系统的功能均发生广泛而显著的变化,有文献报道BALB / c小鼠和ICR 小鼠,经1. 5 h 运输后,小鼠血糖( GLU) 、外周白细胞总数( WBC) 、血清中皮质酮( CORT) 、白细胞介素2( IL2) 和β-内啡肽( β-EP) 均会明显降低。不过在72h之内会逐渐恢复。

小鼠运输后各个指标的变化[4]

03 那如何降低应激,保证小鼠运输福利呢?

运输过程中,大小鼠不可避免地会出现应激反应,我们可以从以下几个方面考虑降低应激反应

1. 包装箱要求

包装箱选择上,一般市内短途运输可以选择内衬细铁丝网格的硬纸板箱,如果运输时间较长需选择外衬瓦伦纸或钙塑材料的铁丝箱盒或塑料箱盒。使用前需仔细检查铁丝笼或内衬细铁丝网是否有凸起倒刺,以防扎伤动物。例如小型啮齿类有专用运输箱,确保充分换气和防止外面微生物污染。

小鼠专用纸包装箱和塑料箱

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