RNA电泳鉴定步骤
一，准备工作
1，实验器具与材料:
(1)移液枪:10ul
(2)吸头:20ul
(3)吸头台:放置 200ul 和 20ul 的吸头一个 (4)三角烧瓶:50ml 一个
(5)琼脂糖 2，实验器具的处理与准备
(1) 塑料制品:(包括吸头等)
送至高压 3 次，试验前将枪头放入吸头台。
(2)电泳板及电泳槽: 用自来水冲洗干净备用
3, 试剂配制和准备:
(1) 电泳缓冲液(TAE):
先配制 0.5mol/L,PH8.0 的 EDTA 溶液:将 37.2g EDTA-Na 加入 160ml 蒸馏水中， 在搅拌器上剧烈搅拌。在用 NaOH 调节溶液 PH 值至 8.0(约需 4gNaOH)。用蒸馏水 定容至 200ml。后送至高压灭菌。室温保存。
再配制 50×TAE 溶液:在 400ml 蒸馏水中溶解 121g Tris 碱，加入 28.55ml 冰乙 酸和 50ml 0.5ml/L EDTA 溶液，再加蒸馏水定容至 500ml，室温保存。
(2)琼脂糖溶液(1.0%):
50×TAE 溶液取 10ml，稀释成 500ml，取 50ml 溶解 0.5g 琼脂糖，电炉上煮至沸
腾，溶化的琼脂物冷却至 60°C左右时加入 10mg/ml EB 5ul，充分混匀，将温热的凝
胶倒入已置好梳子的电泳板中，在室温下放置 45min 左右后进行电泳。 (3)溴化乙锭(EB)(10mg/ml):
在 20ml 水中加入 0.2g 溴化乙锭，磁力搅拌数小时。然后用铝箔包裹容器或将溶液 转移至棕色瓶中，室温保存。
(4)加样缓冲液(Loading Buffer)一般为 6×Loading Buffer
二，电泳鉴定时注意事项:
佩戴一次性手套，避免皮肤接触 EB。无路做胶还是电泳缓冲液尽量用新的，不要超过
两周。
五，电泳步骤
1， 50×TAE 取 10ml 稀释成 500ml，取 50ml 溶解 0.5g 琼脂糖。电炉上煮沸后加入 EB
5ul。另外 450ml TAE 倒入电泳槽中。
9， 用透明胶封闭电泳板，琼脂糖溶液冷却至温热时，倒入带梳子的电泳板中，冷却后，
拔出梳子，放入电泳槽中。
10， 加样:PCR Marker:1ul Marker+1ul Loading Buffer+4ul TAE 混匀于塑料膜上，
加入孔中。PCR 样品:5ul 样品 DNA+1ul Loading Buffer 混匀后依次加入孔中。 11， 接上电源，电压 120V，电流 50mA 进行电泳。
12， 电泳约 1 小时后，紫外灯检测。
