目的基因在真核系统的表达及细胞内的定位实验—荧光法
实验方法原理 | 绿色荧光蛋白(Green fluorecent protein,GFP)最早是在海洋生物水母(Aequorea victoria)中发现的。GFP 蛋白的多肽链中含有特殊的生色团结构,可在紫外光源下发出稳定的绿色荧光,而且这种荧光发射无需外加辅助因子或进行任何特殊处理。GFP 标记分子最常作为标记物来追踪结合分子的表达水平和定位,或作为检测环境变化或蛋白相互作用的指标。目前广泛用于分子和细胞生物学各个领域。 |
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实验材料 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 取转染后24-72 hrs的细胞,置于倒置荧光显微镜下观察含有目的基因的EGFP融合蛋白的亚细胞定位。 |
注意事项 | GFP处于低PH值环境中可能失去荧光效应。 |
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