高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么?
高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时一般注意以下几点:
1. 注意冲洗系统2. 注意冲洗色谱柱;3. 注意冲洗进样口;4. 注意清洗泵头
所有的目的都是为了不让无极盐析出。
因为磷酸盐的水溶性好,但磷酸盐在有机物中的溶解度不好。对于甲醇,乙腈很容易沉淀。然后液体管道会被堵塞。
例如,你的流动相为0.05mol/L KH2PO4-乙腈,每天早晨使用10%乙腈水清洗,然后开始使用仪器,每天使用完仪器后再使用如果流动相为甲醇,则使用甲醇-水。
如果该体系为流动相,则甲醇、乙腈等纯有机相不能直接冲孔,因此需要10%甲醇(乙腈)水缓冲液。也是防止盐析出。
2. 色谱柱也是一样的意思。一般来说,250 mm*4.6 mm色谱柱,1.0 ml/min至少30分钟,好40分钟。然后用纯甲醇或纯乙腈密封。
3.进口,这并不重要看看你的溶剂。如果你用移动相溶解。所以无论是手动注射还是自动注射,每天实验结束后,都要注射纯净水。样本量越大越好。
4.泵头,如果老实验者知道这一点,如果你的流动相含有大量的盐,尤其是当有机相或乙腈时,单向阀特别容易堵塞。如果泵头有在线清洁装置,请务必使用。如果是手动的,就不行了。如果它坏了,把它摘下来超声波。
推荐