高效液相色谱仪选择缓冲盐需要注意的事项
在高效液相色谱仪(HPLC)中，酸或碱缓冲溶液的分离对于保持流动相的恒定pH是非常重要的，并且提高保留时间的再现性。首先，如何选择缓冲溶液：pka和缓冲容量、溶解性、紫外吸收率（使用紫外检测器）、挥发性（MS蒸发光散射检测器）、离子对性能、稳定性和仪器兼容性。
一.根据上述理论,流动相的缓冲能力取决于缓冲盐的pka,缓冲液浓度和流动相的ph。
二.当缓冲液中溶质的两种形式(HA和A)的浓度相等时，即缓冲盐的PKA等于流动相的pH时，缓冲容量最大，高效液相色谱仪的流动相pH值与缓冲盐的pKa值相差越大，缓冲盐的缓冲能力越小。因此缓冲的pKa和流动相的pH不大于约1.0单位。高效液相色谱仪中流动相的缓冲容量一般与缓冲液的浓度成正比，通常在5-25毫摩尔/升范围内。在反相色谱过程中，尤其是当流动相缓冲液浓度较低或进样量较大时，可避免流动相溶解样品的缓冲能力。
三.当高效液相色谱仪的缓冲容量较低时，可以从以下几个方面调整缓冲容量：
1.降低缓冲液pka和流动相ph（可调ph或更换缓冲液）之间的差异
2.矿石大流动相ph与溶质pka之间的差异（当差异足够大时，溶质将完全电离或保持非电离状态）。
3.增加缓冲液浓度
4.减少样品体积
5.调整样品的酸碱度使其与流动相一致。
推荐
