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糖脂的柱层析色谱法分离方法介绍

2022.4.27

  近年来,柱层析色谱柱法是糖脂分离广泛采用的一种分离方法。例如Chia-Chung Hou等,以民间昭和草为原料,将乙酸乙酯萃取相,以氯仿.甲醇为洗脱剂,进行正向硅胶柱层析得到分馏物8,取分馏物8再次进行C18反相硅胶柱层析,以95%甲醇为洗脱剂,得到富含亚麻酸的甘油糖脂成分。

  柱层析色谱法虽然可以大量的处理样品,但是存在不可逆吸附严重、分离效率低、耗时长且溶剂消耗量大等缺点。

  由于同一类糖脂间的差别仅仅体现在酰基脂肪酸组成的不同,分子带电性、分子极性等性质非常接近,用现有的方法很难把单个糖脂从混合糖脂中大量分离出来。所以,从化学品市场上无法购买到完全单一的天然标准糖脂,各大化学品公司以及专门提供脂类标准品的公司都仅仅能提供TLC级别的混合糖脂标准。而只有将混合糖脂中每一个成分的含量结构研究清楚,才能使有关研究(如生物活性)更为深入。因此有必要寻找一种能耗低、分离效率高、大量提取糖脂单一组分的新方法,才能适应于神经生物学研究及临床应用研究的需要。

  逆流色谱是近三十年来发展起来的一种液-液色谱技术 [5] 。它的优点之一是不使用固体吸附材料,可以避免其它色谱技术中那种不可逆吸附、样品降解等缺点;优点之二是能对样品完全回收。作为实验室的一种分离制各技术,逆流色谱已表现出高效液相色谱无法比拟的优点,如对样品的纯净度要求低,进样量大,操作简便等。

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