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凝胶柱干了有什么影响

2022.5.14

凝胶柱干了就无法起到对分子隔离的作用了。

凝胶柱的原理就相当于固定相是一个“反筛子”尺寸比较大的分子因为无法进入凝胶内部,所以就从凝胶之间的空隙里面钻下去了,所以跑得更快。

而尺寸小的分子则会进入凝胶上的微孔,不会太快被冲下来。这样就可以按照分子的尺寸而将混合物分开。

凝胶柱干了,凝胶里面可能就会混进去非常多的气泡,这样产品就很难分开。对于一些要求高产率的课题来说,干一次柱子的结果可能是产率直接掉十个点、或者减半这样的打击非常致命。

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凝胶层析是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中,只留在凝胶颗粒之间的流动相中。

因此以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则能自由出入凝胶颗粒中,并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡,因此就要花费较长的时间流经柱床,从而使不同大小的分子得以分离。

商品凝胶的种类很多,常用的有葡聚糖凝胶(Sephadex G)以及羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)。


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