荷叶叶绿素如何提取以及测定
荷叶又名莲叶、藕叶，为睡莲科莲属多年生大型水生草本植物莲藕的叶片。莲藕作为生长条件要求不高的水生蔬菜，在我国南北方都有分布，主要分布于长江 流域和南方各省。已有研究表明，荷叶营养丰富，除含有普通植物所共有的碳水化合物、脂类、蛋白质、丹宁等常规化学成分外，还富含黄酮类化合物和生物碱。叶绿素作为一种天然色素广泛应用于医药、食品、化妆品等行业，随着人们生活水平的提高，对天然色素的需求量也日趋增长。而叶绿素测定主要通过叶绿素测量仪进行测量。
本文主要从荷叶叶绿素的提取以及测定来分析。其中荷叶的叶绿素提取过程为：荷叶→洗净→吸干表面水分→剪碎→称量→研磨→浸提→离心→测吸光度值。提取具体操作为：浸提溶剂的选择。称取荷叶5g，以乙醚、乙醇、甲酰胺、甲醇、丙酮、氯仿、二甲基亚砜7种溶剂为提取剂，料液比1∶50，于常温条件下分别浸提1d，收集提取液定容后，于波长652nm处测吸光度值，结果可以看出，除了氯仿外，其余提取剂对荷叶叶绿素的提取率都较高，最高的是丙酮。故试验 采用丙酮作为提取溶剂。2.提取剂浓度的选择。称取荷叶5g，分别以65%、75%、80%、85%、90%、95%丙酮和无水丙酮为提取剂，料液比 1∶10，于50℃加热回流提取1.5h。定容后，于波长652nm处测吸光度值，结果可以看出，丙酮浓度为80%~90%时，提取效果都较好。3.料液 比的选择。称取荷叶5g，以85%丙酮为提取剂，料液比分别为1∶5、1∶6、1∶7、1∶8、1∶9，于50℃加热回流提取1.5h，于波长652nm 处测吸光度值，结果可以看出，料液比为1∶7时，提取效果明显优于其他情况。4.提取温度的选择。称取荷叶5g，以选定的溶剂、料液比，分别在30℃、 40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃加热回流提取1.5h，提取液定容后，于波长652nm处测吸光度值，结果可以看出，低温段叶绿素的提取 效果都较好，30℃~40℃时提取液吸光度值明显增大，40℃~60℃时恒定，但当温度超过60℃以后，提取液吸光度值开始下降，可能和叶绿素本身的热稳 定性有关。选定50℃作为进一步研究的温度条件。5.提取时间的选择。称取荷叶5g，以选定的溶剂、料液比，在50℃分别浸提0.5h、1.0h、 1.5h、2.0h、2.5h，提取液定容后，于波长652nm处测吸光度值，结果可以看出，提取时间为1.5h时，提取效果最好。
通过对荷叶叶绿素提取条件的研究，得出荷叶叶绿素提取的优化工艺是以85%丙酮为提取剂，料液比1∶8，提取温度50℃，提取时间1.5h。优化工艺下荷叶叶绿素吸光度值为2.249。将叶绿素提取完后，我们就可以进行叶绿素含量的测定，其中测定有化学方法和比较简单的仪器法。现在一般如果不是精确要求，我们一般都使用叶绿素测量仪进行测定，因为叶绿素测量仪快速、方便，能够在2秒钟内显示出叶绿素SPAD值。
