C反应蛋白测定操作规程
A2．2 原理
用抗人C反应蛋白抗体和样品中C反应蛋白作用，形成抗原抗体复合物使光散射增加。检测散射光变化速率峰值反映样品中C反应蛋白量。本检验科使用XX公司的XX型号特定蛋白测定仪及其公司提供的配套试剂、校准品等进行C反应蛋白测定。
A2．3 标本要求
A2．3．1 使用新鲜血清，不使用血浆。
A2.3．2 在采集血液后的2h内分离血清口并置于具塞试管中。
A2．3．3 8h内不及时测定的血清可存放于2℃～8℃冰箱保存。 3天后测定的血清置-15℃～-20，C冰冻保存。但冰冻血清只能做一次复融。反复冻融会使测定结果下降。
A2.3.4 严重溶血或脂血的标本不能作测定。
A2．4 试剂
A2．4．1 每个试剂均购自XX公司。
1)C反应蛋白抗体(公司试剂盒代号P／N XX)o每个抗体试剂瓶内含已处理过的山羊抗血清
5．0ml,叠氮钠为0．1％(W／W)。
2)XX系统专用稀释液(公司试剂盒代号P／N XX)
3)C反应蛋白校准品(公司试剂盒代号P／N XX)。
4)缓冲液(代号P/N XXX)。
5)至少用2个水平的控制品。
A2．4，2 试剂准备
从冰箱中取出试剂，立即可用。在上机前，须将缓冲液及稀释液颠倒彻底混匀o
A2．4.3 试剂性能可接受性
按测定项目资料手册中质量控制章节所规定内容进行质量控制。结果必须在实验室规定的可接受范围内。
A2.4.4 超过失效期的试剂不可使用。
A2．5 仪器和校准
A2．5.1 使用XX公司的XX型号特定蛋白分析仪。
A2．5．2 将校准品在室温中平衡后，按仪器要求上机校准。
A2．6 操作步骤
A2．6．1 校准步骤
1)在仪器的主显示菜单上按[F5]键做系统设置。按[F1]键做项目设置，在显示信息中确定抗体盘上本项目位置。按[Fl)键修正盘设置，回到主显示菜单。
2)按[F2]键进入校准状态，选择相应项目。按[Fl]键要仪器阅读抗体卡资料，并插入C反应蛋白抗体卡。按[F2]键进入校准品盘设定，确认校准品所在位置。按[F2]键要仪器阅读校准品卡，并插入相应校准品卡。阅读后，按[F1]键。
3)将C反应蛋白校准品200μL加于样品盘的指定位置，另外将校准品5约400μL也加于相应位置，按开始键，启动校准。完成校准后，按[F4]键确认。
A2．6．2 样品操作步骤
1)在主显示菜单上按[Fl]键进入样品测定程序。
2)在各种样品杯确认后，若只做C反应蛋白测定，放置测定样品或控制品200μL置于样品盘内。若同时做类风湿因子，抗“O”，则需样品400μL。这些样品足够做双份测定。
3)若做样品预稀释，用缓冲液对样品做l:6稀释后，将稀释样品250μL置于样品盘内。
(注：请参见XX型仪器操作手册，了解使用原始管和微量管)
A2．7 质量控制
每批测定都使用XX公司控制品做质量控制。请参见XX型系统项目手册附录本规程要求，每月天间CV不超过4％。
A2.8 计算
系统会自动地计算出结果。
A2.9 参考值
XX公司CRP测定以IFCC推荐的欧洲共同体参考局的CRM 470特定蛋白参考血清为标准。使CRP测定在国际上具良好的可比性。
本法的99％参考上限为9mg/L。
A2．10 操作性能
A2.10．1 本法的C反应蛋白可报告范围为4 mg/L～120mg／L，若使用1：6稀释样品上限可达720mg/L。
A2．10.2 精密度
批内n=20
低浓度：x=17.8mg/L s=0.7mg/L CV=3.68％
中浓度：x＝56.7mg/L s＝1.1mg/L CV＝2.02％
高浓度：x=79.4mg/L s＝0.9mg/L CV＝1.13％
天间(每天作2批，共10天)，n=20
低浓度：x=7.4mg/L。 s＝0.28mg/L CV=3.89％
中浓度：x=51.4mg/L s=1.4mg/L CV=2.72％
高浓度：x＝90.8mg/L s=2.7mg/L CV=3.03％
A2．10．3 准确度
与胶乳散射(LNA)法及放射免疫扩散法(RID)比较，对正常和不正常CRP浓度血清作对比：
与LNA法比较：n=100，y=1.08x+3.9，r=0.99
与RID法比较：n=100，y=1.10x+5.2，r=0.99
A2．11 参考文献
Array Systems, Chemistry Information Manual．Beckman Instruction 015 249712 AB．Jan 1996. Beckman Instruments，Inc．Brea．CA 92621—6209. U.S.A．
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