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薄层色谱法的操作步骤及注意事项

2023.4.03

薄层色谱法的操作步骤及注意事项如下:
1、薄层板点样后,应待溶剂挥发完,再放人展开室中展开。
2、展开应密闭,展距一般为8~15cm。薄层板放入展开室时,展开剂不能没过样点。一般情况下,展开剂浸入薄层下端的高度不宜超过0.5cm。
3、展开剂每次展开后,都需要换,不能重复使用。
4、展开后的薄层板用适当的方法,使溶剂挥发完全,然后进行检视。
5、Rf值一般控制在0.3~0.8,当Rf值很大或很小时,应适当改变流动相的比例。
注意事项:铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙匀浆配比般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的平滑外,也影响板涂层的厚度,进一步影响上样量。涂层薄,点样易过载;涂层厚,显色不那么明显。通常,板的质量对薄层鉴别的影响不是很,影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。

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