薄层色谱实验原理简介
薄层色谱，常用TLC表示，是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术。常用的有薄层吸附色谱和薄层分配色谱两种。薄层吸附色谱是将吸附剂均匀地涂在玻璃板上作为固定相，经干燥活化后点上样品，以具有适当极性的有机溶剂作为流动相。当流动相沿薄层展开时，混合样品中易被固定相吸附的组分(即极性较强的成分)移动较慢，而较难被固定相吸附的组分(即极性较弱的成分)移动较快。经过一段时间的展开后，不同组分彼此分开，形成互相分离的斑点，如图2-13所示。它不仅适用于少量样品(1~100 ug甚至0.01 ug)的分离，还适用于较大量样品(可达500 ug)的精制。此法对于挥发性较小或在较高温度时易发生变化而不能用气相色谱法分析的物质特别适用。薄层色谱是在干净的玻璃板、塑料或者铝基片上均匀涂一层合适的吸附剂。待干燥、活化后，将样品溶液用内径为0.5mm、管口平整的普通毛细管点在离薄层板一端约1cm处的起点线上晾干或吹干后，将薄层板放入盛有展开剂的展开槽内，进入深度约0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm处时，将薄层板取出，吹干后喷显色剂显色或者在紫外光灯下显色。计算原点至色斑中心的距离与原点到展开剂前沿的距离的比值，即 Rf值，如图2-14所示。良好的分离，Rf值应在0.2~0.8之间，否则，应更换展开剂重新展开。
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