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同步荧光光谱分析

2018.3.23

同步荧光分析根据激发单色器和发射单色器在扫描过程中彼此间保持的关系,同步扫描荧光技术可分为固定波长差, 固定能量差,和可变角同步扫描三类。固定波长差方法将激发和发射单色器波长维持一定的差值,得到同步荧光光谱。这时如果  相当于或者大于斯托克额斯位移,能够获得尖而窄的荧光峰。荧光物质分子浓度与同步荧光光谱的峰高成线性响应关系。
同步荧光光谱的荧光强度与激发光信号, 荧光发射信号的关系为 : 当物质的浓度一定时,同步荧光信号强度与所用的激发光谱信号和荧光发射光谱信号的乘积成正比。

Fsp (λem , λex) =K C FemFex .   K 为常数,C为待测物的浓度。所以此法灵敏度较高。
固定波长差同步扫描中,的选择直接影响到所得到同步荧光光谱的形状,带宽,和信号强度,从而提供一种提高选择性的途径。
例如,铬氨酸和色氨酸的荧光激发光谱很相似,发射光谱又严重重叠,但15 nm的同步光谱只显示铬氨酸的光谱特征,15 nm的同步光谱只呈现色氨酸的光谱特征,从而可以实现分别测定。固定能量差同步扫描和可变角同步扫描技术可以进一步提高选择性和最大限度地减少瑞利散射和拉曼散射的干扰。同步扫描技术具有使光谱简化,使谱带变窄,提高分辨率减少光谱重叠提高选择性,减少散射光影响等优点。

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