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图像在多通道共焦模式采集下才可以使用

2018.8.21

对 Alexa Fluor 染料家族的光谱叠加作了比较,这在共定位实验中是很有用的。为了比较,所有的发射光谱都做了归一化,叠加区域用灰色阴影显示。在图 2(a) 中,绿色荧光染料 Alexa Fluor 488 和橙黄色荧光染料Alexa Fluor 555 在峰波长处显示很明显的分离,人眼也很容易能够区分。然而,光谱叠加(灰色阴影区域)表明在 Alexa Fluor 555 的发射峰上很明显有 Alexa Fluor488 的发射光谱(用一条黑线标示,从发射峰到横坐标)。当 Alexa Fluor 488 的荧光发射强度明显比 Alexa Fluor 555 的荧光发射强时,荧光信号这么高程度的串色使得荧光探针的分离很难。很多因素都会导致这种情况发生,比如荧光团标的物浓度的巨大差异。因此,在共定位实验中,这些探针的组合就应该避免,或只有当图像在多通道共焦模式采集下才可以使用,这样可以降低或消除串色。

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