生化常规项目在一次性定标后允许误差时限的探讨
目的 探讨临床生化常规项目在全自动生化分析仪检测仪校准、室内质控的有效方法，了解不同项目在不同时限需要重新定标校正，作为本实验室检验合理化的工作模式，确保全自动生化分析仪常规检验结果的准确性。方法 将本室所做的常规生化检测项目每次定标后，以2h检测一次计算定值血清结果，建立质控系统进行质量监控，进行对比，并对结果作统计学处理。结果 在12h内TP ALB TB DB ALT AST ALP GGT CHO TG CK CK-MB LDH HDH BUN Cl－PUA结果分析，差异无显著性(P＞0.05)；K＋ Na＋ Ca２＋ CO2 Cr AMY结果分析，差异有显著性(P＜0.01)。结论 科学地分析和定时进行定标监控，建立起合理化的室内质控系统，是保证全自动生化分析仪检测所有项目结果可靠性的最有效措施。
在全自动生化分析仪检测过程中，质量控制定标校正是每天必须要做的工作之一，通过室内质量控制的目的来判断本批次的测定是否在允许误差范围之内，由于每天检测工作量或随时随做的急诊项目种种原因，定标到项目的检测过程有一段时间，定标至检测这一时间长短不一。那么，定标后多长的时间才出现对测定项目结果产生误差影响而需要从新定标检测。为了解定标至检测时限对检测结果误差增大的影响原因，笔者进行了这方面的研究探讨，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
日本生产的奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪；质控品为美国贝克曼库尔特有限公司(Trid.link)生产的复合非定值临床化学控制血清，批号：EX1-0312R，EX2-0312R。
1.2 方法
用定值血清定标后，每2h检测一次质控血清样本，各测2次，取平均值，当变动偏离靶值1.5mmol/L或5%时结束，连续测量12h，其余的项目分别进行24h、48h和72h的检测，观察定标后在一定时限所检测质控血清检测值的变化情况。
1.3 所检测的项目有
钾(K＋)ISE法、钠(Na＋)ISE法、氯(Cl－)ISE法、钙(Ca２＋)OCPC法、磷(P)磷钼酸紫外法、葡萄糖(GCU)氧化酶法、肌酐(Cr)苦味酸法、尿素氮(BUN)脲酶速率法、总蛋白(TP)双缩脲法、白蛋白(ALB)溴甲酚绿法、尿酸(UA)尿酸过氧化酶法、丙氨酸氨基转移酶(ALT)IFCC速率法、总胆红素(TB)重氮盐法、甘油三酯(TG)CPO-PAP法、胆固醇(CHO)胆固醇氧化酶法、淀粉酶(AMY)酶法、肌酸激酶(CK)DCKC速率法、谷氨酸氨基转移酶(AST)IFCC速率法、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)DCKC速率法、乳酸脱氢酶(CDH)DCKC速率法、高密度脂蛋白(HDL)DCKC速率法、碱性磷酸酶(ALP)对基苯胺速率法、低密度脂蛋白(LDL)L-P速率法，共23个非定值质控血清参考值项目。
1.4 统计学处理
所有检测参数以均值±标准差(x±s)表示，以t检验进行统计学分析处理，P＜0.05为差异有显著性，P＜0.01为差异有极显著性。
2 结果
23个项目12h在全自动生化分析仪检测结果见表1。表1 23个项目12h测定结果(D=2h)(略)
一次性定标后在不同时限不同的检测项目质控血清测定值进行理论值相对偏差比较分析有显著性变化，在12h后变动偏离靶值1.5mmol/L或5%的项目K＋ Na＋ GCU Cr UA ALP AMY，差异有极显著性(P＜0.01)，详见表1。在24h质控血清测定值变动偏离靶值1.5mmol/L或5%的项目分别有Cl- Ca２＋ BUN，48h的有P、HDL，差异有极显著性(P＜0.01)，见表2。其中TB ABL TG CHO ALT TB AST CK GGT CDH LDL在72h内质控血清测定值变动偏离靶值＜1.5mmol/L或5%差异无显著性(P＞0.05)。表2 12h后的检测项目结果（略）
3 讨论
不管哪个实验室要获得可靠的测定结果，都需要建立一个全面的质量控制管理体系［1］。在全面质量管理体系中，实验室的质量控制是一个最重要的环节。目前卫生部临床检验中心在美国CLLA’88规定的基础上制定了我国临床实验室主要检测项目的Tea，并建议我国实验室可据此制定自己实验室质量控制标准和措施［2］。根据这一要求，结合本实验室仪器设备、实验室的工作环境等实际情况，在确定23项临床化学检验常规条件下的变异系数(RCV)R的室内质控有效方法同时，还进行了不同项目定标质控在允许误差范围内的时限探讨，作为临床化学实验室室内质量控制的要求。室内质控应是由实验室采用一系列的办法连续地、客观地评估实验室各项的检测结果，并发现实验室内本身不易发现的不准确性，了解实验室内项目方法之间、不同试剂厂家、不同实验条件之间的差异，便于校正，使其结果具有可比性［3］。
任何一种质量控制方法都不可能消灭误差，而只能将误差控制在一定的、可以被接受的限度之内，而这个限度就是测定的允许误差范围［4］。在质量控制工作中，允许误差范围的确定是十分重要的一个环节。大家都知道在常规测定中四个标本测定都会有误差，这个误差包括各类型的随机误差(RE)和系统误差(SE)，测定结果是直接的差异是RE和SE的总和，即总误差(TE)，可用TE＝1.96S+｜bias｜表示(95%允许误差限)，所选用的检测方法的TE必须在临床可接受的水平范围内，才能用于临床常规检验。实验室内质量控制的目的就是通过对质控品的检测来判断本批次的测定是否在允许总误差(TEa)之内。如在(TEa)之内可以将该批次测定结果发出，否则必须找出误差增大的原因，经过分析评估或重新测定后才能发出检验结果。通过23项临床生化学检验项目在一次性定标后允许误差范围时限的研究表明，在12h后变动偏离靶值1.5mmol/L或5%的项目K＋ Na＋ GCU UA ALP AMY，差异有显著性(P＜0.01)，存在着非随机误差因素，是由于所使用的试剂稳定性、检测学方法及仪器等因素。K＋、Na＋作为电解质的项目要求较高，原来电解质的项目大多不在全自动生化仪上测定，而在生化仪上测定，仪器和试剂可能存在一定的问题。另外，酶法的测定包括终点法、二点法、速率法在验测结果和标准值之间存在着较大的偏差，部分单位参数设置不匹配，可能是引起结果差异的原因之一。ALP测定结果显著偏低标准品标示值，不同试剂的测定结果偏差较大，这与试剂中缓冲液的组成和种类有着直接关系。AMy实验室测定提示可能存在着方法学上的问题。所以本实验室K＋ Na＋ GCU UA ALP AMY项目检测不能超出12h，Cl－ Ca２＋ BUN项目检测不能超出24h，TP ABL TG CHO ALT TB AST CK GGT CDH CDL应据质量控制靶值及允许误差范围确定依据，重新做标定，才能保证检验测定达到较理想，较稳定的条件。
质量控制系各实验室为了监测和评价本室内工作质量，以决定常规检验报告能否发出所采取的一系列检查、控制手段，旨在检测和控制本室内常规工作的精密度，并检测其准确度的改变，提高本室内常规工作中批间和日间标本检测的一致性。在此推荐的值并不代表合理或理想的测定允许误差范围，仅此作为借鉴，已经达到此定标方法的实验室仍应提高测定的精密度，争取不断缩小本室的允许误差范围［4］。由于允许误差范围是反映各室检测精密度的实际水平的指标，不可用推荐值取代本室允许误差来作为本室室内质控的依据。
【参考文献】
1 张克坚，苏增留，张传宝.建立自动化生化分析仪室内质控时应注意的几个问题.世界医疗器械，2000，7(6)：10-15.
2 Judy,Robertson.寻求人才与技术的平行.美全诊断论坛，2004，2，12-14.
3 郑怀竞.免疫学检验室间质评与室内质控.北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1997，3.
4 中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程.南京：东南
作者单位 ： 1 529600 广东阳春，阳春市人民医院
2 广东阳春，阳春市慢性病防治站
