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质粒提取浓度太低是什么原因

2021.11.03

1、增加收菌次数,相对提高了质粒的量,这样的话裂解液的量可以适当增加;
2、裂解要充分,变性和复性按说明应该是不超过5分钟,合理控制时间,一般在3分到4分半的时间都是可以的;
3、过柱子时,吸附的时间尽量长一些,可以在这期间做做其他实验或者吃个饭什么的;
4、如果没有必要,不使用去蛋白液,因为每过一遍柱子,其损耗越大,不过这得根据说明的菌种而定;
4、最后洗脱回收的时候,要单方面提高浓度,就要适当减少洗脱液的量,我一般都是回收到40~50 μL的,同时要增加洗脱次数,一般两三次足矣.

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