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电化学发光免疫测定原理

2021.11.19

电化学反应过程:在工作电极上(阳极)加一定的电压能量作用下,二价的三氯联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+ 释放电子发生氧化反应而成为三价的三氯联吡啶钌[Ru(bpy)3]3+,同时,电极表面的TPA也释放电子发生氧化反应而成为阳离子自由基TPA+,并迅速自发脱去一个质子而形成三丙胺自由基TPA·,这样,在反应体系中就存在具有强氧化性的三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]3+和具有强还原性的三丙胺自由基TPA·。

化学发光过程:具有强氧化性的三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]3+和具有强还原性的三丙胺自由基TPA· 发生氧化还原反应,结果使三价的三氯联吡啶钌[Ru(bpy)3]3+ 还原成激发态的二价的三氯联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+,其能量来源于三价的三氯联吡啶钌[Ru(bpy)3]3+与三丙胺自由基 TPA· 之间的电势差,激发态 [Ru(bpy)3]2+以荧光机制衰变并以释放出一个波长为 62Onm 光子的方式释放能量,而成为基态的 [Ru(bpy) 3 ] 2+ 。

循环过程:上述化学发光过程后,反应体系中仍存在二价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy) 3 ] 2+ 和三丙胺(TPA),使得电极表面的电化学反应和化学发光过程可以继续进行,这样,整个反应过程可以循环进行。

通过上述的循环过程,测定信号不断的放大,从而使检测灵敏度大大提高,所以 ECL 测定具有高灵敏的特点。


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