食品微生物实验室常见19种培养基配方汇总(一)
一、糖发酵管
成分:
牛肉膏 5g
蛋白胨 10g
氯化钠 3g
磷酸氢二钠 2g
0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL
蒸馏水 1000mL
PH 7.4
制法
1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶1000 mL,121℃高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内,以无菌操作分装小试管。
注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。
试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d。迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管
成分:
蛋白胨 20g
猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g
乳糖 10g
0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL
蒸馏水 1000mL
制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10 mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。
注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。
三、5%乳糖发酵管
成分:
蛋白胨 0.2g
氯化钠 0.5g
乳糖 5g
2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL
蒸馏水 100mL
pH 7.4
制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121 ℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。
注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)
成分:
磷酸氢二钾 5g
多胨 7g
葡萄糖 5g
蒸馏水 1000mL
制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL ,121℃高压灭菌15min。
甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。鲜红色为阳性,黄色为阴性,甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20 mL蒸馏水。
V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~4d。哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL充分振摇试管,观察结果阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察。
五、营养明胶
成分:
蛋白胨 5g
牛肉膏 3g
明胶 120g
蒸馏水 1000mL
pH 6.8~7.0
制法:加热溶解,校正至pH7.4~7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固,复查最终pH应为6.8~7.0。
试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在22~25℃培养,每天观察结果,记录液化时间。或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果。
六、苯丙氨酸培养基
成分:
酵母浸膏 3g
DI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g)2g
磷酸氢二钠 1g
氯化钠 5g
琼脂 12g
蒸馏水 1000mL
制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面。
试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36士1℃培养4h或18~24h,滴加10%三氯化铁溶液2~3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。