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如何选择拉曼光谱仪的光学元件?

2020.6.01

  导语:在上期中,我们对拉曼光谱及其便携式光谱仪作了简单的介绍,这次就让我们来看看光谱仪光学模块的内部构造吧。便携式拉曼光谱仪的光学模块主要包括激发光源、拉曼探头以及分光系统。

  激发光源的选择

  拉曼散射的产生需要光进行激发。由于拉曼散射的光强较弱,所以拉曼光谱仪的理想激光光源必须具有良好单色性,高强度和良好的偏振性。

  目前,大多数的拉曼光谱仪使用波长为532nm和785nm的激光源,另外还有 633nm,1064nm等波长。拉曼位移与选用的激光源波长是多少nm无关。虽然同一样品用不同激光照射所产生的频移相同,但仍需要对激光光源的波长进行选择。

  激光光源的波长越小,拉曼散射光强越大,但拉曼信号也越容易被荧光遮蔽。对于生物样本,如果采用 532nm的激光,拉曼信号会被荧光背景遮蔽,这种情况下,使用633nm或785nm的激发波长可以有效地降低荧光背景。

  使用波长较长的激光源时如1064nm,拉曼散射光强低,为了让拉曼散射光容易观察,就需要增大激光源的功率,或者提高曝光时间。对于生物样本,用波长较长的激光源显然具有更好的效果,但也需要主要光强的问题。

  因此,需要综合考虑荧光背景噪声和激光器的激光功率。由于785nm激光器的荧光背景噪声较小,而且通常785nm激光器的激光功率比532nm和633nm激光器强,与1064nm激光器相比,785nm的激发光产生的拉曼信号更强并且不需要很长的曝光时间。所以785nm波长的激光器是便携式拉曼光谱仪的理想选择。

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  激光探头的原理

  拉曼探头的功能是传导,收集,还有滤波。相应的拉曼探头的主要组成部分是入射光纤、收集光纤、滤波片等。

  从激光器输出的光由入射光纤导入,并照射到样品上。激光作用于样品并产生拉曼信号。接收光路收集拉曼信号。滤波片用于过滤瑞利散射(非拉曼散射)信号,同时保留拉曼散射信号。最后由收集光纤将拉曼散射信号传入分光系统。

  拉曼探头的常用结构分为两种。

  一种是双光纤的拉曼探头。简易原理如下图所示。入射光纤与收集光纤各为一根。激发光源从入口11处进入,经过透镜13和滤波片15,透镜17将光折射并使光聚焦于样品。透镜17收集来自于样品的拉曼散射光并过滤掉瑞利散射,最后经过滤波片16和透镜14将拉曼信号传入收集光纤中。

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  另一种是多光纤的拉曼探头。简易原理如下图所示。中间的光纤是入射光纤。周围的其余光纤都是收集光纤。由于收集光纤数量多,因此它的灵敏度较高。但同时价格也高于双光纤拉曼探头。

  分光系统的原理

  分光系统是光谱仪的最重要部分。分光系统是把包含多种波长成分的光分开,射向不同的方向,成为许多波长范围狭小的单色光,从而能够辨认出入射光的波长成分。

  根据色散元件,分光系统可以分成两种类型:棱镜和光栅。

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  棱镜分光系统的光学仪器是三棱镜。它是一种透明材料并具有三角形剖面的光学仪器。由于棱镜所能提供的色散能力较弱,所以棱镜分光系统的分辨率较低,在现代光谱仪中已经基本被淘汰。这里就不在多做介绍。

  光栅分光系统的工作原理是光的衍射。光栅可分为透射光栅和反射光栅。透射光栅是光学平板玻璃上具有相等间距的划线,划线处光线不能穿过,不是划线的地方则是光线可以穿过的狭缝;反射光栅是在金属镜上具有相等间距的划线,划线上发生漫反射,未划线处发生衍射,相当于一组衍射狭缝。通常采用反射光栅作为分光系统。

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  图中可以看出,不同波长的光在通过反射光栅之后具有不同的衍射角,实现了分光。反射光栅的色散能力越强,将波长差距很小的光分离开的能力就越强,意味着光栅的分辨率越高。因此,光栅的色散能力成为分光系统的首要考虑因素。


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